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陰溝腸桿菌分離瓊脂（ECIA）

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奶粉中陰溝腸桿菌的污染一直受到人們的關注，本視頻以《SN/T 2552.7-2010 乳與乳制品衛生微生物學檢驗方法 第7部分：陰溝腸桿菌檢驗》為依據，詳細講述一下陰溝腸桿菌的分離與鑒定操作。
1.分離：輕輕混勻增菌液，用下列方法進行平板接種：
（1）直接涂布法：每份增菌液取0.2 mL加到2個陰溝腸桿菌分離瓊脂平板（ECIA），每個平板0.1 mL，用無菌玻璃涂布棒涂布（如果預計奶粉中含有大量的細菌，應使用滅菌的EE肉湯將增菌液稀釋10-4~10-6后涂布）。
（2）直接劃線法：每份增菌液用3 mm接種環（10 μL）分別接種2個陰溝腸桿菌分離瓊脂平板，三區法或四區法劃線，以得到單個菌落。將平板倒置于36℃±1℃，培養18 h～22 h。
觀察平板上陰溝腸桿菌的典型形態，在陰溝腸桿菌分離瓊脂平板上：黃色菌落，圓形，凸起，直徑2 mm~3 mm。
2.初步鑒定：從陰溝腸桿菌分離瓊脂平板上挑取5個可疑菌落，分別進行初步生化試驗：賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶、精氨酸雙水解酶試驗。
3.對賴氨酸脫羧酶陰性、鳥氨酸脫羧酶陽性、精氨酸雙水解酶陽性的可疑菌落，進行革蘭氏染色，氧化酶試驗。
4.對革蘭氏染色陰性，氧化酶試驗陰性的可疑菌落進行KCN生長試驗、蔗糖、衛矛醇、棉子糖、D-山梨醇、黃色素試驗。
5.若出現以上生化結果KCN生長試驗+、蔗糖+、衛矛醇（－）、棉子糖＋??、D-山梨醇＋、黃色??素試驗－，即可報告檢出陰溝腸桿菌。