大腸桿菌O157:H7顯色培養基是青島龙8娱乐官方网站生物公司改良的培養基,用于食品、病人糞便樣品中O157:H7菌的快速檢測。O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍色暈圈,大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色、藍色或紫色,菌落周圍有藍色暈圈;其它細菌顯藍色、黃色或無色。本培養基的特異性高,可以克服SMAC培養基引起的假陽性和假陰性結果,是一種很理想的快速檢測培養基。
成份(g/L)
特殊營養物質
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68.4
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混合顯色劑
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2.6
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瓊脂
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15.0
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pH7.0±0.1 25℃
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CT添加劑 1ml/支*5(已配套,無需另購)
此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最佳的結果。
用法
稱取本品17.2g 加入200ml 蒸餾水,加熱煮沸溶解并不停攪拌,加熱2分鐘左右。冷卻至4??5-50℃ 時,加入一支CT添加劑混勻,傾入無菌平皿。
注意:制備好的培養基一定要保持表面干燥,可在36℃ 的培養箱中倒置放置1-2小時。
原理
O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周??圍沒有藍色暈圈,?大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色、藍色或紫色,菌落周圍有藍色暈圈;其它細菌顯藍色、黃色或無色。本培養基的特異性高,可以克服SMAC培養基引起的假陽性和假陰性結果,是一種很理想的快速檢測培養基。
操作步驟
1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;
2、取 25 克樣品液加入 225ml mEC肉湯或mTSB肉湯中,?36℃ 增菌培養 18-24 小時;
3、用 3mm 接種環取 1 環增菌?液,劃線接種到O157菌顯色培養基上,做 2 個平板;
4、36℃ 培養 18-24h,O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌??落周圍沒有藍色暈圈;大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色、藍色或紫色,菌落周圍有藍色暈圈;其它細菌顯藍色、黃色或無色;
5、對典型菌落可做O157:H7菌血清學試驗和全套生化試驗。
注:必須在 36℃ 培養 24 小時內判讀結果,以免菌落顏色發生變化。
質量控制
1、外觀
此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈灰白色。制備好的平板呈藍色固體培養基。
2、微生物試驗
在 36℃ 培養 18-24h 小時:
質控菌株
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ATCC
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生長情況
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菌落顏色
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大腸桿菌O157
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35150
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+++
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亮紅色
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金黃色葡萄球菌
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25923
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-/+
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黃色或無色
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大腸桿菌
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25922
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+/-
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暗藍色,菌落周圍有藍色暈圈
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沙門氏菌
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14028
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+++
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藍色
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奇異變形桿菌
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12453
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+/-
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無色
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肺炎克雷伯氏菌
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10031
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+/-
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藍色,菌落周圍有藍色暈圈
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弗氏檸檬酸鹽桿菌
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43864
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+/-
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藍色菌落有紫色中心,菌落周圍有藍色暈圈
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坂崎桿菌
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29004
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++
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紫色至藍色
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方法的局限性
本培養基上的典型大腸桿菌O157:H7必須做血清學試驗或生化試驗。
典型特征
?? 典型大腸桿菌O157:H7菌?顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍色暈圈;大腸桿菌和大腸菌群顯藍色或紫色,菌落周圍有藍色暈圈;其它細菌顯藍色、黃色或無色;
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O157顯色培養基
大腸埃希氏菌O157:H7 ATCC35150
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O157顯色培養基
大腸埃希氏菌O157:H7 ATCC43888
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貯存
制備好的平板可保存 2-5 天,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥?處?, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
注意
此培養基僅供實驗室使用。
參考文獻
1、Rappaport, F., and E. Henig. 1952. Media for the isolation and di??fferentia??tion of pathogenic Escherichia coli (serotypes 0111 and 055). J. Clin. Pathol. 5:361-362.
2、 U??.S. Food and Drug Administration. 1995. Bacteriological analytical manual, 8 th ed., AOAC International, Gaithersburg, MD.
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O157顯色培養基的微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養基,接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時。
相關資料:
操作視頻|培養基的加熱滅菌操作(以XLD 、SC為例)-點擊查看實驗操作視頻
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O157顯色培養基的原理和使用方法 點擊查看