一、試驗原理:
胰蛋白胨提供微生物生長所需的營養,磷酸氫二鈉和磷酸二氫鉀為緩沖劑,維持PH值得穩定?,牛膽鹽和煌綠抑制革蘭氏陽性菌和非腸道菌群的生長,D-甘露醇提供碳源。
二、培養基配方:
胰蛋白胨 |
10.0 |
D-甘露醇 牛膽鹽 磷酸氫二鈉 磷酸二氫鉀 |
5.0 20.0 6.5 2.0 |
煌綠 |
0.0135 |
pH7.2±0.2 25℃ |
三、試驗方法:
??1、稱取本品45g,加熱溶解于1000ml純化水中,分裝于三角錐形瓶或試管中,100℃水浴滅菌30min,迅速在流動的冷水中冷卻,無需高壓滅菌。
2、將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯培養過夜或采?用其他制備?方法,制備成含菌量10-100CFU/mL的菌懸液。
3、在裝有待測培養基的試管中接種1 mL?目標菌,非目標菌接種100-1000CFU,同時接種兩個平行管,置于36℃培養18-24h。
四、試驗結果:
接種以下質控菌株,在36±1℃培養18-24小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量/CFU |
試驗結果 |
產氣腸桿菌 |
ATCC13048 |
10-100 |
渾濁變黃 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
渾濁變黃 |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
10-100 |
渾濁變黃 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
100-1000 |
抑制 |
圖1 EEM培養基試驗結果
a:大腸埃希氏菌;b:鼠傷寒沙門氏菌;c:產氣腸桿菌;d:金黃色葡萄球菌;e:空白對照
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