用于大腸菌群的固體平板檢測,其中蛋白胨提供氮源;乳糖提供碳源;去氧膽酸鈉是一種抑菌劑,主要抑制革蘭氏陽性菌的生長;磷酸氫二鉀是一種緩沖體系;檸檬酸鐵和檸檬酸鈉是一種生長促進劑;中性紅是一種指示劑,在酸性時呈紅色,當大腸菌群發酵乳酸時產生酸性物質,所以菌落呈紅色;氯?化鈉是維持細菌生長時的滲透壓;瓊脂是一種凝固??劑。
二、試驗方法:
稱取本品43.0g,加入1000ml蒸餾水,加熱溶解??并不停攪拌,煮沸1分鐘。冷卻至45-50℃左右時,傾入無菌平皿,無需高壓滅菌。使用前,把制備好的平板放置室溫10-20分?鐘。
1、制備質控菌液。
2、選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻涂布于平板上,每一稀釋度接種兩個平板。
3、用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表面?劃六條平行直線,同時接種兩個平板。
4、35℃倒置培養基培養24小時,記錄實驗結果。
三、結果判定:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
回收率 |
其他特征 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
G≤1 |
/ |
/ |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
紅色菌落 |
傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
無色透明菌落 |
弗氏檸檬酸鹽桿菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
紅色菌落 |
陰溝腸桿菌 |
ATCC23355 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
紅色菌落 |
圖1-2 去氧膽酸鹽瓊脂微生物質控結果
備注:a:金黃色葡萄球菌,b:大腸埃希氏菌,c:傷寒沙門氏菌,d:弗氏檸檬酸鹽桿菌,e:陰溝腸桿菌
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