一、培養基和試劑

    培養基：普通?瓊脂斜面或巧克力瓊脂平板培養基試劑：3%過氧化氫水溶液

二、試驗原理

    本試驗是通過檢查某些細??菌是否產生??過氧化氫酶以作為生化鑒定指標之一。過氧化氫酶可將過氧化氫分解成水并釋放出分子氧，試驗中可產生大量氣泡。

三、試驗方法  將待試培養物移種于上述培養基，于36±1℃培養18-24h。

（1）平板法：挑取單個菌落，置于潔凈的載玻片上或小試管中，然后加入3%過氧化氫1-2滴，觀察有無氣泡產生。?如有氣泡產生，判斷??為陽性（如圖1）。亦可在單個菌落上滴加1滴3%的過氧化氫，觀察有無氣泡（如圖2）。

圖1 載玻片上試驗結果

圖2 平皿菌落上試驗結果

（2）斜面法：于培養18-24h瓊脂斜面培養物表面加1ml3%過氧化氫，立即觀察有無氣泡產生。

四、注意事項

（1）本試驗使用過氧化氫的濃度食品檢驗GB統一要求為3%。

（2）本試驗不宜使用血瓊脂的培養物，因紅血球含有過氧化??氫酶，可能造成假陽性結果，所以只采用已將紅血球破壞的巧克力瓊脂培養基。

（3）必須使用新鮮培養物，不得應用超過72h的培養物。因為只有活的細??菌才會有過氧化氫酶，?老培養物可能引起假陰性或弱陽性。

（4）挑取待試培養物，應使用白金針或環，不得使用含鐵金屬制成的接種針或?接種環，因為微量的鐵的污染，也可造成假陽性結果。

五、有關過氧化氫爆炸的一些說明

&???nbsp;   由于過氧化氫本身的不穩定性，遇有機物、金屬、受熱或見光都會分解生成氧氣。所以必須避光、低溫或常溫保存。

在使用過氧化氫試劑時，可能會有部分過氧化氫分解產生的氧氣積聚在試劑瓶的狹小空間內，導致瓶內氣壓較高。在掰開瓶口時，有時會聽到“撲”地一??聲，偶爾會有類似爆炸的聲音，甚至將瓶體炸裂或炸碎。所以，在掰開瓶口時，尤其要注意安全：

（1）嚴格參考產品的保質期，在保質期內使用；

（2）穿好實驗服，帶實驗手套，做好常規防護；

（3）盡量在超凈臺等有防護罩的空間內掰開試劑瓶，或者眼睛盡量遠離瓶口；

（4）為?了更為保險，?可以將試劑瓶置于小塑料袋中，在塑料袋的保護下掰開瓶口，以免爆裂的玻璃瓶碎片四處灑落。

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