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一、試驗原理：
本培養基主要用于用于瓊脂紙片擴散法（kirby-baner紙片擴散法）測定細菌對抗生素敏感性。 牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、維生素和氨基酸；可溶性淀粉吸收有毒的代謝產物；瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方（g/L）：
|
牛肉粉 |
6.0 |
|
可溶性淀粉 |
1.5 |
|
酸水解酪蛋白 |
17.5 |
|
瓊脂 |
17.0 |
|
pH 7.3±0.1 25℃ |
|
三、試驗方法：
1.平板的制備與保存
稱取Mueller-Hinton瓊脂42.0g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min，傾注培養基到無菌平皿中，使之在平皿中形成一個厚度為4-5 mm的瓊脂層。傾注后將平板放到水平平面，使瓊脂冷卻凝固。凝固后的培養基應立即使用或存放于暗處和（或）5 ℃±3 ℃冰箱的密封袋中，在有效期內使用。使用前應可將平板置35 ℃溫箱中或置室溫層流櫥中對瓊脂表面進行干燥，培養基表面應濕潤，但不能有水滴，培養皿也不應有水滴。
2. 質控菌株的復蘇
將質控菌株接種到TSA平板上，按標準方法中規定的培養時間和溫度進行培養。檢查純度合格后，用于質控工作菌懸液的制備。
3. 質控菌工作菌懸液的制備
將純度滿意的質控菌株培養物懸浮于TSB肉湯中，并調整濁度為0.5麥氏標準（約1×108 CFU/mL～2×108 CFU/mL）。
4. 接種
用涂布法將質控工作菌懸液接種于MH平板上，并貼上相應的抗生素紙片（每平板最多貼6片），將平板翻轉后按標準方法中規定的培養時間和溫度進行培養。調整菌懸液濁度與接種所有平板間的時間????間隔不要超過15 min。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株，放置36±1℃需氧培養18-24小時。在無反射黑色背景下，觀察有無抑菌環。
MH瓊脂質控參考標準
|
抗生素名稱 |
紙片抗生素 (mg) |
抑菌圈（mm） |
|||
|
大腸埃希菌 ATCC 25922 |
銅綠假單胞菌 ATCC 27853 |
金黃色葡萄球菌 ATCC 25923 |
糞腸球菌 ATCC 29212 |
||
|
慶大霉素 |
10 |
19-26 |
16-21 |
19-27 |
|
|
羥芐青霉素 |
100 |
23-29 |
18-24 |
- |
|
|
四環素 |
30 |
18-25 |
- |
24-30 |
|
|
多黏菌素B |
300IU |
12-16 |
11-16 |
- |
|
|
氯霉素 |
30 |
21-27 |
- |
19-26 |
|
|
TMP-SMZ |
1.25/23.75 |
24-32 |
- |
24-32 |
≥20 |
|
頭孢哌酮 |
75 |
28-34 |
23-29 |
24-33 |
|
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