（1）在肉膏蛋白胨斜面試管上，用記號筆寫上將接種的菌名、日期和接種者。 

（2）點燃酒精燈或煤氣燈。

（3）將菌種試管和??待接種的斜?面試管，用大拇指和食指、中指、無名指握在左手中，并將中指夾在兩試管之間，使斜面向上，成水平狀態，。在火焰邊用右手松動試管塞，以利于接種時拔出。 

（?4）右手拿接種環通過火焰燒灼滅菌（參照實驗一），在火焰邊用右手?的手掌邊緣和小指，小指和無名指分別夾持棉塞（或試管帽），將其取出，并迅速燒灼管口。

（5）將滅菌的接種環伸入菌種試管內，先將環接觸試管內壁或未長菌的培養基，達到冷卻的目的，然后再挑取少許菌??苔。將接種環退出菌種試管，迅速伸入待接種的斜面試管，用環在斜面上自試管底部向上端輕輕地劃直線，勿將培養基劃破，也不要使環接觸??管壁或管口。 

（6）接種環退出斜面試管，再用火焰燒管口，并在火焰邊將試管塞塞上。將接種環逐漸接近火焰，再燒灼。如果接種環上沾的菌體較多時，??應先將環在火焰邊烤干，然后燒灼，以免未燒死的菌種飛濺出污染環境，接種病原菌時更要注意此點。

二、液體培養基接種 

  向肉膏蛋白胨液體培養基中接種少量菌體時，其操作步驟基本與斜面接種時相同，不同之處是挑取菌體的接種環放入液體培養基后，應在液體表面處的管內壁上輕輕磨擦，使菌體從環上脫落，混進液體培養基，塞好試管塞后，搖動液體，使菌體在液體中分布均勻，或用試管振蕩器混勻。

三、穿刺接種

  用接??種針挑取菌種（針必須挺直），自培養基的中心垂直地刺入半固體培養??基中，直至接近管底，但不要穿透，然后沿原穿刺線將針拔出，塞上試管塞，燒灼接種針。 

  上述幾種接種法的無菌操作，凡未敘述的均按實驗一操作。試驗者應反復練習無菌操作接種技術，直至較熟練地掌握。

四、將已接種的斜面、液體和半固體培養基放置28—30℃溫箱，培養2—3天后取出觀察結果。

上一篇：微生物無菌取樣技術

下一篇：檢測實驗室易存在這七大類風險問題