一、實驗原理:
某些細菌分解葡萄糖生成丙酮酸,丙酮酸可進一??步脫羧生成乙酰甲基甲醇,乙酰甲基甲醇在堿性環境下被氧化成為二乙酰,后者與蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用,生成紅色的胍縮二乙酰而呈現紅色,為VP試驗陽性。若培??養基中胍基含量少,可加入少量含胍基的化合物如肌??酸肌酐等(本試驗加入α萘酚)可以加速其反應。
二、試劑與器材:
1、菌種:大腸埃希氏菌、產氣腸桿菌。
2、培養基:葡萄糖蛋白胨水。
3、試劑:VP試液甲液(6%α萘酚酒精溶液)和乙液(40%KOH溶液)
三、操作步驟:
Barritt法:將大腸埃希氏菌和產氣腸桿菌分別接種于葡萄糖蛋白胨水中,35℃培養24h~48h,于培養物中先加入VP試液甲液(6%α萘酚酒精溶液)6滴,搖勻,再加入乙液(40%KOH溶液)2滴,搖勻,觀察結果。
四、試驗結果:
如立即于數分鐘內出現紅色反應者為陽性;若不出現紅色反應,可將試管置35℃孵育4h后再行觀察,仍無紅色出現者為陰性。本試驗大腸埃希氏菌為陰性、產氣腸桿菌為陽性。
五、注意事項:
滴加VP試劑甲液和乙液后需搖勻,靜置10min后才能看到紅色化合物出現。
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