前 言
本標準代替GB/T4789.6—2003《食品衛生微生物學檢驗 致瀉大腸埃希氏菌檢驗》。
本標準與GB/T4789.6—2003相比,主要變化如下:
———標準名稱修改為“食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 致瀉大腸埃希氏菌檢驗”;
———增加了術語和定義、縮略語;
———增加了血清學試驗中H 抗原鑒定;
———增加了PCR確認試驗;
———增加了附錄A;
———修改了設備和材料;
———修改了培養基和試劑;
———修改了檢驗程序;
———修改了血清學試驗中致瀉大腸埃希氏菌所包括的O 抗原群;
———刪除了腸毒素試驗。埃希氏菌。該菌無動力、不發生賴氨酸脫羧反應、不發酵乳糖,生化反應和抗原結構均近似痢疾志賀氏菌。侵入上皮細胞的關鍵基因是侵襲性質粒上的抗原編碼基因及其調控基因??,如ipaH 基因、ipaR 基因(又稱為invE 基因)。

4 培養基和試劑
4.1 營養肉湯:見A.1。
4.2 腸道菌增菌肉湯:見A.2。
4.3 麥康凱瓊脂(MAC):見A.3。
4.4 伊紅美藍瓊脂(EMB):見A.4。
4.5 三糖鐵(TSI)瓊脂:見A.5。
4.6 蛋白胨水、靛基質試劑:見A.6。
4.7 半固體瓊脂:見A.7。
4.8 尿素瓊脂(pH7.2):見A.8。
4.9 氰化鉀(KCN)培養基:見A.9。
4.10 氧化酶試劑:見A.10。
4.11 革蘭氏染色液:見A.11。
4.12 BHI肉湯:見A.12。
4.13 福爾馬林(含38%~40%甲醛)。
4.14 鑒定試劑盒。
4.15 大腸埃希氏菌診斷血清。
4.16 滅菌去離子水。
4.17 0.85%滅菌生理鹽水。
4.18 TE(pH8.0):見A.13。
4.19 10×PCR反應緩沖液:見A.14。
4.20 25mmol/L MgCl2。
4.21 dNTPs:dATP、dTTP、dGTP、dCTP每種濃度為2.5mmol/L。
4.22 5U/LTaq酶。
4.23 引物。
4.24 50×TAE電泳緩沖液:見A.15。
4.25 瓊脂糖。
4.26 溴化乙錠(EB)或其他核酸染料。
4.27 6×上樣緩沖液:見A.16。
4.28 Marker:分子量包含100bp、200bp、300bp、400bp?、500bp、600bp、700bp、800bp、900bp、1000bp、1500bp條帶。
4.29 致瀉大腸埃希氏菌PCR試劑盒。

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