維生素B12測定培養基是一種微生物檢測?液體培養基,主?要用于嬰兒食品和乳粉中維生素B12測定。
該培養基的配制及使用方法為:稱取本品 7.6g加熱攪拌溶解于 100ml蒸餾水中,煮沸 2-3分鐘,分裝試管,每管 5ml,使沉淀物分散均勻,加入標準品或測試樣品,用蒸餾水補體積至 10ml,121℃高壓滅菌 5分鐘,備用。具體維生素B?12的測定方?法參照GB 541314-2010食品安全國家標準嬰幼兒食品和乳品中維生素B12的測定。
由于維?生素B12在某些特定環境中極易分解,測定維生素B12的實驗過程要求嚴格,因此要格外注??意以下幾點:
1.準備玻璃儀器時,使用活性劑對硬玻璃測定管及其他必要的?玻璃器皿進行清洗,清洗之后要求在2?00℃干熱2 h。
2.使用本品前必須檢查培養基是否超出質保期,有??無污染、吸潮結塊現象,高壓滅菌后是否有沉淀,如存在上述問題不??得使用。
3.為保證實驗結果準確,樣品必須盡快接種培養,實驗全??過程避光,忌高溫,控制培養pH 5.5-6.3(pH用1N的HCL和1N的NaO??H調制)。
4.滅菌:121℃高壓滅菌 5分鐘后迅速冷卻使用為宜。
5.培養基僅用于外部診斷。
6.培養后須做滅菌處理。
為什么實驗過程要保持避光?
主要是由于維生素B12見?光(紫外線)極易分解,若不避光將會嚴重影響測定結果,?甚至導致標準曲線難以測定。
為什么維生素B12測定培養基高壓滅菌時間短?
因為維生素B12測定培養基中含有大量的氨?基酸、嘌呤、糖等物質,如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。
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