摘要
&?nbsp;目前藥敏試驗一般采用牛津杯法,其過程繁瑣,需要專用的陶瓦蓋。本研究采用HB四連式牛津杯替代牛津杯進行藥敏試驗,其操作過程簡單,可以在一次性平皿中進行試驗,節??省成本,其效果與牛津杯接近,可以替代牛津杯進行藥敏試驗。
試驗方法
1、菌懸液的制備
將菌種接種于營養瓊脂斜面上生長,用生理鹽水將菌苔洗下,震蕩混勻。
2、抗生素溶液的制備
按照《中國藥典》中抗生素濃度標準配制。
3、倒平板及接種
取直徑為90mm、高度為14mm的一次性平皿,注入?約15mL加熱融化的培養基,使其在平皿底內均勻攤布,放置在水平臺面上使其凝固,作為底層。另取適量培養基加熱融化后,放冷至48-50℃(芽孢可至60℃),加入適量的菌懸液(能得到清晰的抑菌圈為度),搖勻,再向平皿中注入約5mL,使在底層上均勻攤布,作為菌層(試驗的關鍵是固體培養基表明平整),放置在水平臺上冷卻。
4、放置HB四連式牛津杯及添加抗生素
HB四連式牛津杯已經輻照滅菌,可以直接使用。用無菌鑷子夾住HB四連式牛津杯正面的凸點(標有“龙8娱乐官方网站生物”的為正面),將其放置在菌層培養基表面上,用壓杯板放置在HB四連式牛津杯10秒左右,使其底部與培養基接觸緊密,防止漏液。對角的2個小管分別滴入高濃度的抗生素溶液,另一對角的2個小管分別滴入低濃度的抗生素溶液。
5、培養及檢定
小心平穩的將平皿在規定的條件下培養,然后測量各個抑菌圈直徑,HB四連式牛津杯產生的抑菌圈直徑與傳統的牛津杯??產生的抑菌圈直徑基本一致,說明HB四連式牛津杯??可以替代傳統牛津杯,如下圖所示。
牛津杯與HB四連式牛津杯產生的抑菌圈
結論
HB四連式牛津杯操作方便簡單;試驗條件簡單,可以在一次性平皿中進行,不必在??陶瓦蓋中進行,節省成本;重復性高,穩定性好,產生的抑菌圈直徑與牛津杯直徑很接近。因此可以替代牛津杯來進行藥敏試驗。
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