原理
將250mL水樣用孔徑為0.45μm的濾膜過濾,并將濾膜移至CN瓊脂培養基上,于36℃士1℃恒
溫箱中培養48h,能夠在溴化十六烷基三甲銨選擇性培養基上生長并產生綠膿菌素,或者能夠在溴化十六烷基三甲銨選擇性培養基上生長并且氧化酶呈陽性、紫外??光(360±20nm)照射下能發熒光、能夠??利用乙酰胺產氨的革蘭氏陰性無芽孢桿菌,經證實為銅綠假單胞菌,則其檢測結果為陽性。
培養基和試劑
假單胞菌瓊脂基礎培養基/CN瓊脂(配制好之后低溫避光保存)
金氏B(King’s B)培養基(配制好之后低溫避光保存)
乙酰胺肉湯(用蒸餾水配制,配置好之后低溫避光保存)
營養瓊脂
氧化酶試劑
鈉氏試劑(配制好之后低溫避光保存)
設備和儀器
玻璃器具:所有玻璃器皿使用前需121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘
恒溫培養箱:36℃±1℃
紫外燈:波長應為360±20nm
濾膜:直徑47mm,微孔徑為0.45μm(處理方法:如濾膜未經滅菌,則使用前需先將濾膜放入燒杯中,加入蒸餾水,置于沸水浴中煮沸滅菌3次,每次15 min。前兩次煮沸后需更換水,用蒸餾水洗滌2次~3次,以除去殘留溶劑。建議使用一次性無菌濾膜。)
顯微鏡:10×~100×
冰箱:0℃~8℃
操作流程圖
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