學習并掌握細菌莢膜染色的原理及方法。

二、原理

細菌的莢膜不易著色，但通透性較好，染料可通過莢膜使菌體著色，所以，染色后?在有顏色的菌體周圍，有一淺色或無??色的透明圏，即為莢膜。為了更清楚地觀察莢膜常用負染色法，即用有色的背景來襯托出沒有染上顏色的莢膜。

三、材料

1.菌種在阿須貝無氮培養基上培養2〜3d的圓褐固氮菌或硅酸鹽細菌。

2.儀器?及其他顯微鏡、酒精燈、載玻片、石炭酸復紅染液、1%黑素或繪圖墨水、95%酒精、在阿須貝無氮培養基上培養2~3d的圓褐固氮菌或硅酸鹽細菌。

四、方法與步驟

  （1）在干凈的載玻片中央，滴加無菌水少許。

（2）挑取培養2〜3d硅酸鹽細菌斜面菌體制成涂片，晾干（不可用火焰烘干〕。

（3）加酒精1滴固定（不可加熱〉，待酒精蒸發掉為止。

(4）石炭酸復紅染色液染色3〜4min然后水洗，晾干。

（5）用種環取少許黑素于載玻片—端，另取一塊邊緣光滑的載玻片與黑素接觸并向玻片兩側稍滑動幾下使黑素散開，再以均勻速度向涂片部位推動?，通過涂片部位使之成一均勻而且厚薄適中的薄層，自然干燥。也可用繪圖墨水1滴，滴于涂片部位附近，再用另一玻片的一端接觸墨滴，使之向旁邊散開，然后拉過涂片部位，注意墨滴不可太大。

⑷鏡檢、繪圖。

操作中應注??意的問題：由于莢膜中含有大量的水分和多糖或多肽類物質，因而受熱時容易失水收縮使菌體變形，所以染色時不要加熱固定。

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