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低溫誘導霉菌分生孢子同步生長實驗



錄入時間:2015-3-2 9:26:40 來源:青島龙8娱乐官方网站生物

    原理

  使培養液中微生物的生理狀態比較一致生長發育處在同一階段的培養方法稱同步培養法。同步培養的方法很多,最常用的有選擇法和誘導法兩種。
(一)選擇法

  選擇法是通過過濾、密度梯度離心、膜吸附和直接選擇等方法,從細胞群體中選擇處于同一生長發育階段的細胞來進行培養的方法。 

1、離心沉降分離法  處于不同生長階段的細胞’其個體大小不同,通過離心就可在一定程度分開,然用同樣大小的細胞進行培養便可獲得同步培養

2過濾分離法  用孔徑不同的微孔濾膜可將大小不同的細胞分,剛分裂的幼齡菌體較小,能通過濾孔其余菌體在濾膜將濾液中的幼齡細胞進行培養,就可得到同步培養物。

3.硝酸纖維素薄膜法  先將菌液通過硝酸纖維素膜,由于細菌與濾膜帶有不同電所以細菌能吸附于膜上,翻轉薄膜,用新鮮培養液濾過培養,附著于膜上的細菌分離后的子細胞由于不與薄膜直接接觸,及菌體本身的重量,加之附著著培養物液的重量,便下落到收器內,短時收集的細菌接種培養,便可得到同步培養物

選擇法同步培養影響曲體代謝下獲得的,因而菌體的生命活動較為正常,有其缺點,一些微生物即使個體大小相同,其發階段也可能不完全一致,這樣的微物不宜采用這種方法。
(二)誘導法

  誘導法主要是通過制環境條件如溫度、養物質等來誘導同步生長。
1.溫度調
  將微生物的培養溫度制在亞適溫度段時間,使其緩慢地進行代謝,但又不進行分裂。然將培養溫度提高到最生長溫度,大多數細胞就會同步分裂。
2.營養條件調整法  控制營養物的濃度或組成以達到同步生長。限制碳源或他營物,使細胞只能進行次分裂而不能繼續生長,從而獲得剛分裂的細胞群體然后再轉適宜的培養屮.它們便進入同步長。

  誘導法除上述兩種外還有其他方法,誘導法的缺點會給細胞的正常代謝帶來一些不利影響。

  材料

黑曲霉斜面菌種.麥芽汁平板4

方法與步驟

1.懸液的制備  取數環孢子放入盛有50ml無菌水的三角瓶(瓶內放玻璃珠若干)

充分制成孢子懸液,孢子量約105個/ml

2.用鑷子取圓形無菌玻璃紙1張(與培小相似,放在麥芽汁平板上。
3
.取孢子懸0.1ml放在板上,用玻璃涂布器涂布均勻,置于冰箱(42h取出,放30溫箱培養1h。同時設一對照不經低溫處理接放入30溫箱培養11h

4.  孢廠出芽率,并比較菌絲生長情況

 

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