培養基應適合需氣菌、厭氣菌或真菌的生長,可按以下處方制備,亦可使用按該處
方生產的符合規定的脫水培養基。以下培養基制備時,均以115℃滅菌30分鐘。
1.需氣菌、厭氣菌培養基(硫乙醇酸鹽流體培養基)
酪胨(胰酶水解) 15g 氯化鈉 2.5g
葡萄糖 5g 新配制的0.1%刃天青溶液 1.0ml
L-胱氨酸 0.5g (或新配制的0.2%亞甲藍溶液0.5ml)
硫乙醇酸鈉 0.5g 瓊脂 0.5~0.7g
(或硫乙醇酸0.3ml) 水 1000ml
酵母浸出粉 5g
除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分加入水內,微溫溶解后,調節pH為弱堿性,
煮沸,濾清,加入葡萄糖和刃天青溶液,搖勻,調節pH值使滅菌后為7.1±0.2,分裝,
滅菌。
在供試品接種前, 培養基指示劑氧化層的顏色不得超過培養基深度約1/5,否則,須
經水浴煮沸加熱, 只限加熱一次。
2.真菌培養基
胨 5g 磷酸氫二鉀 1g
酵母浸出粉 2g 硫酸鎂 0.5g
葡萄糖 20g 水 1000ml
除葡萄糖外,取上述成分加入水內,微溫溶解后,調節pH值約為6.8,煮沸,加葡萄
糖溶解后,搖勻,濾清,調節pH值使滅菌后為6.4±0.2,分裝,滅菌。
3.選擇性培養基
(1) 對氨基苯甲酸培養基(用于磺胺類藥物的無菌檢查) 照上述需氣菌、厭氣菌
培養基及真菌培養基的處方及制法,各加對氨基苯甲酸0.125g,溶解后,搖勻,分裝,滅
菌。
(2) 聚山梨酯80培養基(用于油劑藥品的無菌檢查) 照上述需氣菌、厭氣菌培養基
及真菌培養基的處方及制法,各加10ml聚山梨酯80,搖勻,分裝,滅菌。
4.營養肉湯培養基
胨 10g 肉浸液 1000ml
氯化鈉 5g
取胨和氯化鈉加入肉浸液內,微溫溶解后,調節pH為弱堿性,煮沸,濾清,調節pH
值使滅菌后為7.2±0.2,分裝,滅菌。
5.營養瓊脂培養基
照上述營養肉湯培養基的處方及制法,加入15~20g瓊脂,調節pH值使滅菌后為7.2
±0.2,分裝,滅菌。
6.0.5%葡萄糖肉湯培養基
胨 10g 葡萄糖 5g
氯化鈉 5g 肉浸液 1000ml
取胨和氯化鈉加入肉浸液內,微溫溶解后,調節pH為弱堿性,煮沸,加葡萄糖溶解
后,搖勻,濾清,調節pH值使滅菌后為7.2±0.2,分裝,滅菌。
7.真菌瓊脂培養基
照真菌培養基的處方及制法,加入15~20g瓊脂,調節pH值使滅菌后為6.4±0.2,分
裝,滅菌,趁熱斜放使凝固成斜面。
上述培養基分別按15ml與40ml或需要量分裝于試管功其他容器中,裝量約為試管或
容器高度的2/5,按規定的溫度和時間滅菌。細菌培養基經30~35℃培養48小時,真菌培
養基經20~25℃培養72小時后,應無菌生長。
【附注】 肉浸液制備法 取新鮮牛肉,除去肌腱及脂肪,切細,絞碎后,每1000
g加水3000ml,充分拌勻,在2~10℃浸泡20~24小時,煮沸1小時,濾過,壓干肉渣,補
足液量,分裝,滅菌,置冷暗處備用。也可用牛肉浸出粉3g,加水1000ml,配成溶液代
替。
培養基質量應通過靈敏度檢查。
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