原??理:銅綠假單胞菌產生一種脫酰胺酶,可使乙酰胺經脫酰胺作用釋放氨,滴加納氏試劑(碘化汞鉀),氨(NH4+)在堿性條件下與碘化汞鉀作用,生成紅色的絡合物。
操作:將純培養物接種到裝有乙酰胺肉湯的試管中,在36℃±1℃下培養20h~24h。然后向每支試??管培養物加入1~2滴鈉氏試劑,檢??查各試管的產氨情況,如表現出從深黃色到磚紅色的顏色變化,則為陽性結果,否則為陰性。
原理:氧化酶(細胞色素氧化酶)是細胞色素呼吸酶系統的最終呼吸酶。具有氧化??酶的細菌,首先使?細胞色素C氧化,再由氧化型細胞色素C使對苯二胺氧化,生成有色的醌類化合物。
操作:取2~3滴新鮮??配制的氧化酶試劑滴到放于平皿里的潔凈濾紙上。用鉑金絲接種環或玻璃棒,將適量的純種培養物涂布在預備好的濾紙上。在10秒內顯深藍紫色的視為陽性反應。也可以按照商品化氧化酶測試產品的說明書進行該項測試。
產熒光素實驗(金氏B培養基)
原理:蛋白胨提供氮源;磷酸鹽促進熒光素的產生并抑制綠膿色素的產生;硫酸鎂為熒光素的產生提供必須的陽離子;瓊脂使??培養基的凝固。
操作:將上述呈紅褐色的且氧化酶反應呈陽性的培養物接種于金氏B培養基上,于36℃±1℃恒溫箱培養24h~5d。每天?需取出在紫??外燈下檢查其是否產生熒光,將5d內產生熒光的菌落記錄為陽性。
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