樣品的稀釋

固體和半固體食品??：以無菌操作取25g樣品,放入裝有225 mL生理鹽水的無菌均質杯內,于8000 ～10000r/min均質1min～2min,制成1:10樣品勻液，或放入225 mL生理鹽水的無菌均質袋中，用拍擊式均質器拍打1min～2min，制成1:10的樣品勻液。

液體食品：以無菌吸管吸取樣品25mL放??入裝有22??5mL生理鹽水的無菌玻璃瓶(瓶內預置適當數量的玻璃珠)中,充分混勻，制成1:10的樣品勻液。

用1 mL無菌吸管或微量移液器吸取1：10的樣品勻液1 mL加到裝有9 mL PBS的稀釋管??中，充分混勻制??成1：100的樣品勻液。

制備十倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1次，換用1支1mL無菌吸管或吸頭。

根據對樣品污染狀況的估計，選擇2～3個適宜的連續稀釋度的樣品勻液（液體樣品可以選擇原液），??每個稀釋度分別吸取1mL樣品均勻加入兩個無菌平皿內。同時分別取1mL稀釋液加入兩個無菌平皿內作空白對照。

及時將15~20ml冷卻至46℃平板計數瓊脂培養基（可放置于?46℃ ±1℃恒溫水浴箱內保溫）傾注平板，并轉動平皿使其混合均勻。

瓊脂凝固后，將平板翻轉，置36±1℃培養48±2h。水產品30±1℃培養72±3h。

如果樣品中可能含有在瓊脂培養基表面彌漫生成的菌落時，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養??基（4mL），凝固后翻轉平板，進行培養。

菌落計數

可用肉眼觀察，必要??時用放大鏡檢查，記錄稀釋倍數和相應的菌落數量。菌落計數以菌落形成單位（（??CFU）表示。

選取菌落數在30~300之間、無蔓延菌落生成的平板計數菌落總數。低于30 CFU的平板記錄具體菌落數，大于300的可記錄為多不可計。每個稀釋度的菌落數應采用兩?個平板的平均數。

其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應以無片狀菌落生?長的平板作為該稀釋度的菌落數；若片狀菌落不到平板一半，而另一半又分布均勻，則可以半??個平板的菌落數乘2代表一個平板的菌落數。

當平板上出現菌落間無明顯界限的鏈狀生長時，則將每條單鏈作為一個菌落計數。  

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