將測試片的透明面朝上置于培養箱內,堆疊片數不超過20片,在36C ± 1C下培養24±2 h。培養24±2 h后,如果測試片上沒有菌落生長或菌落全部是典型紫紅色,檢驗完畢;如果培養24±2 h時測試片上出現除典型紫紅色以外顏色的菌落,如黑色、藍綠色等,需使用確認反應片作進一步確認。
確認反應片并非每個檢測都要使用,只有當24h培養后測試片上出現除典型紫紅色以外顏色菌落時才用;
測試片的培養時間不要超過26h。
當需要使用確認反應片時,將上層膜掀起,將確認反應片置入測試片的培養范圍內,再將上層膜放下覆蓋在確認反應片上,用手指以滑動的方式輕輕將測試片與確認反應片壓緊,包括確認反應片的邊緣,此步驟可使測試片與確認反應片緊密接觸并除去氣泡,最后把插入確認反應片的測試片放在36C ± 1C的培養箱內培養1-3 h。
插入確認反應片后培養時間不要超過3h
菌落計數: 到培養時間應立即計數,可目視、或用標準菌落計數器來計數,放大鏡可輔助計數;
1)選取菌落數在15-150之間的測試片作為計數標準。
2)選擇菌落數在15-150之間的稀釋度,乘以稀釋倍數報告之;
3)如??果所有稀釋度測試片上的菌落數都小于15, 則計數稀釋度最低的測試片上的菌落數乘以稀釋倍數報告之;
4)如果所有稀釋度的測試片上均無菌落生長,則以(<)1乘以最低稀釋倍數報告之;
5)如果最高稀釋度的菌落數大于150個時,計數最高稀釋度的測試片上的菌落數乘以稀釋倍數報告之,計數菌落數大于150個的測試片時,可計數一個或兩個具有代表性的方格內的菌落數,換算成單個方格內的菌落數后乘以30即為測試片上估算的金?黃色葡萄球菌數 (圓形生長面積為30 cm2)。最終菌落濃度的單位以”cfu/g (mL)”表示
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