增菌

以無菌操作取檢樣25g(mL)加入到含有225mL mEC+n肉湯的均質袋中，在拍擊式均質器上連續均質1～2??　min。于36±1℃培養18～24h。同時做陽性及陰性對照。

mEC肉湯

胰蛋白胨提供碳氮????源；新生霉素、3號膽鹽抑制革蘭氏陽性菌，特別抑制革蘭氏陽性桿菌和糞鏈球菌；乳糖是可發酵的糖類；磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀為緩沖劑；氯化鈉可維持均衡的滲透壓。

分離

取增菌后或篩選試驗陽性的mEC+n肉湯，分別劃線或適當稀釋后取0.1mL涂布接種于CT-SMAC平板和改良CHROMagar O157顯色瓊脂平板上，于36±1℃培養18～24h，觀察菌落。必要時將混合菌落分純。在CT-SMAC平板上，發酵山梨醇的菌落為紅色；典型菌落為不發酵山梨醇的圓形、光滑、較小的無色菌落，中心呈現較暗的灰褐色，用接??種針挑起時無拉絲現象。在改良CHROMagar O157顯色瓊脂平板上為圓形、較小的菌落，中心呈淡紫色-紫紅色，邊緣無色或淺灰色。

改良山梨醇麥康凱(CT-SMAC)瓊脂

蛋白胨提供氮源、維生素和生長因子；氯化鈉維持均衡的滲透壓??；山梨醇為可發酵的糖類；三號膽鹽、結晶紫抑制革蘭氏陽性菌，亞碲酸鉀抑制非0157的大腸桿菌，頭孢克肟??抑制變形桿菌；中性紅為pH指示劑；瓊脂是培養基的凝固劑。

增菌后的肉湯在取樣前，應輕微搖晃混勻。

劃線時應多次往返，保證分離效果。

大部分非O157 E.coli??發酵山梨醇，仍有6%不發酵山梨醇，它們與摩根氏菌和哈夫尼亞菌一樣在CT-SMAC上表現為與O157相同的菌落特征。

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