取經30 ℃±1 ℃培養24 h±2 h并于室溫放置3 d~4 d的營養瓊脂?培養物少許于載玻片上,滴加蒸餾水混勻并涂成薄膜。經自然干燥,微火固定后,加甲醇作用30 s后傾去,再通過火焰干燥,于載玻片上滴滿0.5%堿性復紅,放火焰上加熱(微見蒸氣,勿使染液沸騰)持續1 min~2 min,移去火焰,再更換染色液再次加溫染色30 s,傾去染液用潔凈自來水徹底清洗、晾干后鏡檢。
觀察有無游離芽胞(淺紅色)和染成深紅色的菱形、正方形或其它形狀的蛋白結晶體。如發現游離芽胞形成的不豐富,應將培養物置室溫2 d~3 d再行?檢查。放置3d~4d以上的蘇云金芽胞桿菌培養物有大量的結晶體,但是只有在芽胞裂解通過上述染色方法才能見到。然而,除非見到芽胞,否則培養物應在室溫繼續放置幾天以重新檢查毒素晶體。其它芽胞桿菌不產?生蛋白質毒素晶體。
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