樣品處理

冷凍樣品應在45 ℃以下不超過15 min 或在2 ℃～5 ℃不超過18 h 解凍，

若不能及時檢驗，應放于-10?℃ ~ -20℃保存；非冷凍而易腐的樣品應盡可能及時檢驗，若不能及時檢驗，應置于2 ℃～5 ℃冰箱保存，24 h 內檢驗。

樣品制備

稱取樣品25 g，放入盛有225 mL PBS 或生理鹽水的無菌均質杯內，用旋轉刀片式均質器以8000 r/min～10000 r/min 均質1 min～2 min，或放入盛有225 mLPBS 或生理鹽水的無菌均質袋中，用拍擊式均質器拍打1 min～2 min。若樣品為液態，吸取25 mL?? 樣品至盛有225 mL PBS 或生理鹽水的無菌?錐形瓶(瓶內可預置適當數量的無菌玻璃珠)中，振蕩混勻，作為1:10 的樣品勻液。

樣品的稀釋

吸取上述1:10 的樣品勻液1 mL 加到裝有9 mL PBS 或生理鹽水的稀釋管中，充分混勻制成1:100 的樣品勻液。據對樣品污染狀況的估計，按上述操??作，依次制成十倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1 次，換用1 支1mL 無菌吸管或吸頭。

樣品接種

根據對樣品污染狀況的估計，選擇2 個～3 個適宜稀釋度的樣品勻液（液體樣品可包括原液），??以0.3 mL、0.3 mL、0.4 mL 接種量分別入三塊MYP 瓊脂平板，然后用無菌L 棒涂布整個平板，注意不要觸及平板邊緣。使用前，如MYP瓊脂平板表面有水珠，可放在25 ℃～50 ℃的培養箱里干燥，直到平板表面的水珠消失。

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