細菌總數測定
指被檢樣品經過采樣處理,在一定條件下培養后(含培養基成分、培養溫度、培養時間、pH值、需氧?性質等),25cm2表面上所含菌落的總數。本方法規定的培養條件下所得結果,只包括一群在營養瓊脂上生長發育的嗜中溫性需氧菌落總數??。
檢測細??菌總數主要作為判定公用毛巾、床上臥具被污染的程度的標志,及清洗消毒效果的判定和評價提供依據。
操作步驟
1 采樣方法
1)隨機抽取清洗消毒后準備使用的毛巾、床上臥具。
2)用滅菌生理鹽水濕潤棉拭子,在毛巾、枕巾對折后兩面的中央各25cm2(5cm×5cm)面積?范圍;床單、被單在上下兩部各25cm2范圍內有順序地來回涂抹,用滅菌剪刀剪去棉簽手接觸的部分,將棉簽手接觸的部分,將棉拭子放入10mL生理鹽水內,4h內送檢。
2 檢驗方法
1)將放有棉拭子的吸管充分振搖。此液為1:10稀釋液。
2)以無菌操作,吸取2mL檢樣,分別注入到??兩塊滅菌平皿內,每皿1mL。如污染嚴重,可十倍遞增稀釋,即吸取1mL加到9mL滅菌生理鹽水中??,混勻,此液為1:100稀釋液。每個稀釋度做兩塊平皿。
?3)將已融化冷至45℃左右的營養瓊脂培養基傾入平皿,沒皿約15mL,并立即旋搖平皿。冷凝后放36℃±1℃培養箱培養48h。
菌落計數方法
作平皿菌落計數時,可用肉眼觀察,必要時用放大鏡??檢查以防遺漏,在記下各平皿的菌落計數后,求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數。若平皿中有連成片狀的菌落?,該平皿不宜計數;若片狀菌不到平皿的一半,而其余一半中菌落分布均勻,則可將此半個平皿菌落計數后乘2,代表全皿菌落數。
公用毛巾、床上臥具細菌總數按公式(1)計算:
&??nbsp; m=k·n /2 ¨¨¨¨¨¨(1)
式中:m——細菌總數,cfu/25cm2
&nbs??p; &nb??sp; k——稀釋倍數;
 ?; &nbs??p; n——平均菌落數。
菌落報告方式
GB/T 18204.2—2000中的第9章
大腸菌群
指一群在37℃、24h能發酵乳糖、產酸、產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭陰性無芽孢桿菌。
該菌主要來源于人畜糞便,故以此作為糞??便污染指標來評價公用?毛巾、床上臥具的衛生質量。
操作步驟
紙片法:用滅菌生理鹽水濕潤5cm×5cm大腸菌群快速測定紙片兩張,分別粘貼在毛巾、床上臥具規定部位和面積范圍內,約30s后取下,置于無菌塑料袋內。將已采樣的紙片置36℃±1℃培養箱內培養16~?18h,觀察結果。
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