制備
接種兩管3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂試管斜面,36℃±1℃培養18 h〜24 h用含3%氯化鈉的5% 甘油溶液沖洗3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂斜面培養物,獲得濃厚的菌懸液。
K抗原的鑒定
取一管6.1制備好的菌懸液,首先用多價K抗血清進行檢測,出現凝集反應時再用單個的抗血清進 行檢測。用蠟筆在一張玻片上劃出適當數量的間隔和一個對照間隔。在每個間隔內各滴加一滴菌懸液, 并對應加入一滴K抗血清。在對照間隔內加一滴3%氯化??鈉溶液。輕微傾斜玻片,使各成分相混合,再 前后傾動玻片1min。陽性凝集反應可以立即觀察到。
O 抗原的鑒定
將??另外一管的菌懸液轉移到離心管內,121℃滅菌1 h滅菌后4 000 r/min離心15 min,棄去上層液 體,沉淀用生理鹽水洗三次,每次4 000 r/min離心15 min,最后一次離心后留少許上層液體,混勻制成 菌懸液。用蠟筆將玻片劃分成相等的間隔。在每個間隔內加入一滴菌懸液,將O群血清分別加一滴到間 隔內,最后一個間隔加一滴生理鹽水作為自凝對照。輕微傾斜玻片,使各成分相混合,再前后傾動玻片 1 min。陽性凝集反應可以立即觀察到。如果未見到與O群血清的凝集反應,將菌懸液121℃再次高壓1 h后,重新檢測如果仍為陰性,則培養物的O抗原屬于未知。根據表1報告血清學分型結果。
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