? 用Charlett改良的Newman染色劑對Breed涂片染色，鏡檢,檢測 體細胞和/或細菌。也可用改良的(無堿件品紅的)Newman染色劑染色

兩種國際認可的鏡檢方法如下：

a. 電子分子汁數板(如Coulter計數板）

b. 先用溴化乙啶著色，然后用熒光適微鏡進行自動細胞計數

? c. 在血瓊脂平板上劃線，篩選引發乳腺炎的鏈球菌菌落。若菌落不易判定，可用 Edward七葉苷結晶紫血瓊脂代替。

若檢測到引發乳腺炎的病原體或診斷出有乳腺炎臨床或亞臨床癥狀時，用抗生素藥 敏實驗確認。

?? Whiteside或加利福尼亞快速間接測試法。因菌體核酸釋放導致堿或表面活性劑 增加，引起牛奶黏度增強，以此判斷牛奶中細菌的數n。這些測試方法的優點是能在農場 進行現場測試。

 Breed細胞涂片計數

?? 實驗室診斷乳腺炎最有效的方法之一是Breed氏涂片技 術與Newman或類似的染色技術結合檢測細胞總量。健康奶牛的奶中也含有一 些細胞，主要是上皮細胞和少量的白細胞，患有乳腺炎的牛產的奶，因乳房發炎會導致白 細胞數量的劇增。在泌乳早期、晚期的奶中，細胞數量也會有所增加，但這往往是因為上 皮細胞的數量增加而引起的。這些細胞可用特殊染 色技術加以區分。但是,Blackburn和其同事認為除泌乳晚期奶之外，細 胞數最的不同對乳腺炎的診斷無特殊意義。當用1/4樣品診斷時，一個載玻片上可同時 制備同一牛乳中的四個涂片樣品。

下面方法適用于待加熱生乳衛生質量的評估：

?? 從健康牛的乳房無菌擠出的生奶，每毫升含有幾百-幾千個細菌，大多是微球菌屬和 乳類口喉棒狀桿菌。非無菌擠奶通常會將許多微生物從外界(如從乳房衷面，牛糞、土壤、 墊草、飼料）帶人優質奶中。奶擠出之后到加熱處理之前有一段延緩期，為細菌的生長 和繁殖提供了有利條件。奶中微生物的種類和數量取決于存儲溫度，若奶被擠出后很快 冷卻并冷藏保存，假單胞菌屬的嗜冷、嗜溫菌及某些芽孢仟菌、桿菌會生長繁殖；若延緩期 在冷卻之前，則乳酸菌會大量繁殖。

? 從農場抽取的冷藏生奶樣品，30℃下的需氧嗜溫細菌數量應小于104個/ml;而乳品 加丁廠大量冷藏的原料奶，30℃下生長的需氧嗜溫菌數應小于105個/mL多數情況 下生奶的檢測（如顯微鏡檢查)主要是針對乳腺炎進行的，最好對農場奶中逐一抽樣進行 檢驗。細菌計數等檢測項目是用于生產和儲存衛生質量的評估。

乳腺炎的檢查

?? 多數用于牛乳腺炎診斷的實驗室方法都能用于檢測牛奶的品質變化，這種品質變化 往往是由于牛奶受到微生物的污染所造成的。同時細菌培養法也被嘗試著用于病原菌的 分離,這種方法也能用于抗生素的藥敏實驗。在抽取牛奶樣品進行細菌檢測前要先對擠 奶者的手和牛的乳房進行清潔和消毒，這一點非常重要。將開始擠出的奶棄掉，中段奶直 接擠人一個無菌樣品瓶。初步普查的牛群，可分別取1/4樣品，混合后進行詳細的調查，應 從可疑的群體中抽取1/4樣品，單獨檢測。當牛或奶呈現亞臨床癥狀(隱性感染）即無肉 眼可見的異常現象時，實驗室檢測尤為重要

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