用van Niel的酵母浸膏乳酸鹽肉湯（見325頁）從瑞士奶酪屮分離到乳酸菌。 這種培養基之所以稱之為選擇培養基是因為它能提供滿足丙酸菌生長而抑制其他菌生長 的最小的營養?成分，需要時可以用它做丙酸桿菌的計數。在原始的van Niel肉湯培養基 中加人瓊脂就可制成半固體培養基。培養基中的乳酸發酵可以產生二氧化碳，所以，若培 養后培養基產生分裂，則可懷疑有丙酸菌存在。如可能應在由Gas Pak®系統 提供5%的CO2厭氧狀態下分離丙酸菌。

操作步驟

(1) 制備稀釋液，在45℃接種熔化的酵母膏乙酸半固休瓊脂，在手中轉動 試管充分混勻，立至冷卻，表面用冷卻至45℃的2%瓊脂封住，30℃培養。最好在5%的 二氧化碳厭氧的環境中培養7〜10d。

(2) 試管的培養基表面若出現氣體裂縫則認為有可疑的丙酸菌，用顯微鏡觀察并進 一.步轉接培養驗??證。丙酸菌為小的革蘭氏陽性球桿菌，無運動性。通過這些特征能很容 易地將它與培養基中的大腸菌群和梭狀芽孢桿菌區分開。記錄產生裂縫的??最髙稀釋度， 得出每克奶酪中丙酸菌的佔計值。

(3) 從一個可疑的陽性管中取一環菌劃線于酵母膏乙酸瓊脂，30℃培養5〜7d后，再 用5%的二氧化碳厭氧培養或將層狀平板置于富含二氧化碳的環境中需氧培養，最好采 用厭氧培養法：

(4) 選擇單個菌落：革蘭氏染色后觀察，將可疑菌落轉接到酵母浸膏乳酸鹽肉湯或 酵母葡萄糖肉汁湯中，30℃培養,需要時應再次劃線分離。 ?

(5) 分離的純菌株穿刺接種到酵母葡萄糖肉汁瓊脂??中，培??養到有菌長出， 然后表面用滅菌的液體石蠟覆蓋。

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