Park和Sanders研制了一種分離受損彎曲桿菌的選擇性培養基。ISO 10272: 1995標準推薦使用這種培養基分離彎曲桿菌。因為ISO現行??方法(1997年版)和英國標 準1996修定版所介紹的抗生素混合物的制備方法都不太恰當,目前暫時仍使用Exeter 培養基分離彎曲桿菌,按照Roberts等人(1995??)的操作步驟進行操作。Cony等(1995) 對各種不同的增菌、分離培養基的合理性和優點進行了詳盡的比較。
??由于這類培養基成分復雜,制備吋很微小的偏差都會對培養基的性能造成很大的影 響,因此,?最好使用商品化的脫水培養基和制備好的抗生素補充液。
平板置于含5%〜10%氧氣、10%二氧化碳和85%〜90%氮氣的微需氧環境中培養。 將厭氧罐(不加催化劑的)部分排空,再注人氮氣-二氧化碳混合氣體至大氣壓,就能很容 易地得到這種混合的培養環境。也可用能安裝在厭氧罐(不含催化劑)上的空氣吸收/發 生袋(如牛津彎曲桿菌袋)或空氣發生袋(對于不含催化劑的罐)獲得培養環境(例如牛津彎曲桿菌產氣試劑盒-BR56與3.4L含催化劑的厭氧罐結合使用,或BR60與2.5L含催 化劑的厭氧罐結合使用)。
檢測步驟
從生禽肉等樣品中直接分離
擦拭小雞的皮膚(尤其是肛門附近的部位)或腹腔,用拭子在Preston血瓊脂平板、 Exeter瓊脂平板或Preston無血頭孢哌酮瓊脂平板的表面劃線接種。置于微需氧環境中培養(見前文)血瓊脂或Exeter瓊脂37C培養4h,在42C下培養44〜68h; Preston 無血頭孢哌酮瓊脂37T:培養48hc
冷凍食品增菌
(1) 將25g食品混人225mLExeter液體培養基中,用均質器混勻。轉人到帶螺帽的 容器中(罐或瓶),容器頂部的開口要小(有利于保?持微需氧環境),擰緊螺帽,在37℃:培養 18-48h
(2) 轉接選擇性瓊脂培養基(如Preston無血頭孢哌酮瓊脂,Ex?eter瓊脂或Preston血 瓊脂)。
驗證
用鏡檢觀察法進行彎曲桿菌的?驗證(運動、革??蘭氏陰性、無孢子、彎曲的s-型的桿狀 菌)。另外,彎曲桿菌的過氧化氫酶和氣化酶試驗為陽性
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