霉菌的鑒定步驟
錄入時間:2013-11-8 10:00:42
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1、分離、純化菌種: 應用分離培養基和純種移植法,在相應的培養基上培養出單純菌株。
2、培養特性的觀察:按照培養時間、生長速度、菌落質地、顏色、形態、氣味、培養基表面變化、孢子及菌絲的顏色、結構、大小進行觀察并記錄。 3、顯微特征的觀察 (1)制片鏡檢:
在潔凈的載玻片上加一滴乳酸-苯酚液,用經過火焰滅菌的接種鉤從菌落的邊緣挑取少許幼嫩的菌體,置于乳酸-苯酚溶液中,然后加蓋玻片,注意不要產生氣泡,此為臨時性的載片標本;若需保存較長時間,可在蓋玻片周圍用加拿大樹膠封牢,貼上標簽,做成半永久性標本。 (2)活體觀察
活體觀察有小培養、大培養和霉變糧粒的顯微觀察3種方法。
①小培養(載玻片培養):在無菌條件下,滴一滴無菌的培養基于干凈的載玻片上,接種后蓋上蓋玻片,放人已滅菌的培養皿中,用滅菌的濕棉球或紗布保持濕度,蓋好皿蓋置培養箱中進行培養,可以隨時用顯微鏡觀察其生長和發育情況。
②大培養(培養皿培養):即將培養有霉菌菌落的培養皿除去皿蓋置于顯微鏡的載物臺上,用低倍鏡觀察霉菌的生長情況,可以看到其營養菌絲、子實體及孢子等。
觀察時必須注意:勿讓鏡頭接觸霉菌而污染;觀察人員不能面對標本,防止孢子飛散吸人體內,影響健康;觀察完畢立即加蓋,防止污染標本。 ③霉變糧粒觀察:取發霉的糧食顆粒,放在載玻片上,然后用低倍鏡觀察發霉糧粒上的霉菌生長狀態和個體形態。
④進行活體觀察時,如果倒置顯微鏡就更方便、更便于觀察;如果遇到比較好的菌種標準或視野,也可以用照相機拍下來,苡便長期保存。
4、查對資料、鑒定菌種:根據培養特征、顯微特征觀察和記錄的結果,查對菌屬檢索表和有關的技術資料,依據菌種的培養性狀和個體形態,即可鑒定出霉菌的屬、群、系或種。
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