利用有利于菌種保藏的一切因素,先將微生物在極低溫度(-70℃ 左右)下快速冷凍,然后減壓下利用升華現象除去水分(真空干燥),使微生物始終處于低溫、干燥、缺氧的條件下,因而它是迄今為止最有效的菌種保藏法之一。
適用于菌種長期保存,一般可保存數年至十余年。但設備和操作都比較復雜。 操作流程:準備安瓿管→準備脫脂乳→準備菌種→制備菌懸液→分裝樣品→冷凍→真空干燥→封管→存活性檢測→保藏→活化。 安瓿管先用2%HCl浸泡,再水洗多次,烘干。
將標簽放入安瓿管內,管口塞上棉花,121℃ 滅菌30min,備用。
一般,細菌要求24~48h的培養物;酵母需培養3d;形成孢子的微生物則宜保存;放線菌與絲狀真菌則培養7~10d。
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