把含有1%葡萄糖的瓊脂培養基裝至試管的三分之二高度，冷卻凝固后，用接種針穿刺接種至瓊脂底部，培養后厭氧菌在底部生長，越接近表面越差。也可在滅菌后冷卻至45℃左右的瓊脂中，直接用無菌吸管加入適量的菌懸液，然后迅速用兩手搓轉試管使之混勻，再放入冷水中使之凝固。培養后厭氧菌會在管的深處出現。

 

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