一、基本原理:
革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種重要的鑒別染色法。1884年由丹麥醫師Gram創立。此法可將細菌分為革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌兩大類。
革蘭氏染色的機理主要是利用兩類細菌的細胞壁成分和結構的不同。革蘭氏陰性菌的細胞壁中含有較多的類脂質,而肽聚糖的含量較少。當用酒精或丙酮酸脫色時,類脂質被溶解,增加了細胞壁的通透性,使初染后的結晶紫和碘的復合物易于滲出,結果細胞被脫色,經復染后,又染上復染液的顏色。而革蘭氏陽性菌細胞壁中肽聚糖的含量多而且交聯度大,類脂質含量少,經乙醇或丙酮洗脫后,肽聚糖層的孔徑變小,通透性降低,因此細胞仍保留初染時的顏色。
二、基本步驟:
將涂片在火焰上固定,滴加結晶紫染液,染1min,水洗;滴加革蘭氏碘液,作用1min,水洗;滴加95%乙醇脫色約15~30s,直至染色液被洗掉,不要過分脫色,水洗;
滴加番紅復染液,復染1min,水洗、待干、鏡檢。結果:革蘭氏陽性菌呈紫色,革蘭氏陰性菌呈紅色。
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