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霍亂弧菌——流行病學分型技術



錄入時間:2012-2-20 16:46:14 來源:互聯網

    霍亂弧菌(V.cholerae)污染食品,可引起食源性疾病的暴發。主要表現為劇 烈的嘔吐,腹瀉,失水,死亡率甚高。屬于國際檢疫傳染病。

    流行病學分型技術: 

    生物型的鑒別

    第Ⅳ組噬菌體(106/毫升)裂解試驗:第Ⅳ組霍亂噬菌體常規稀釋液(106/毫升)一般只裂解霍亂弧菌古典型,而不裂解埃爾托型(有少數例外)。第Ⅳ組霍亂噬菌體原液(109/毫升)對古典型、埃爾托型均能裂解。 

    多粘菌素B敏感試驗:在冷卻至約50℃的普通瓊脂中加入多粘菌素B(50單位/毫升),混合后制成平板。然后將2-3小時的菌培養物一環接種在平板。然后將2-3小時的菌培養物一環接種在平板表面,待干后置37℃培養過夜,觀察結果。古典型敏感(不生長或生長不足10個菌落),埃爾托不敏感(多粘菌株形成菌苔)。也可用多粘菌素B紙片(50單位)按藥敏感試驗方法進行。

    雞血球凝集試驗:加一滴生理鹽水于玻片上,挑取被檢菌培養物于鹽水中制成濃厚的菌懸液,取一滴2.5%雞血球懸液混于菌懸液中,搖勻,一分鐘內出現血球凝集者為陽性,血球呈均勻分散狀態為陰性。埃爾托型為陽性,古典型一般為陰性。

    VP試驗:將被檢菌接種于葡萄糖磷酸鹽蛋白胨水中,于37℃培養2-3天后,取出1毫升加5%α-奈酚酒精溶液0.6毫升,震蕩5秒鐘,再加入40%氫氧化鉀0.2毫升,再震蕩5秒鐘,于室溫中放置2-5分鐘,1小時內出現紅色者為陽性。古典型為陰性,埃爾托型多為陽性。
    噬菌體、生物分型:為區別埃爾托型的兩類不同菌株(流行株與非流行株)和不同菌型,對不同來源的菌株進行分型,可追溯病原的來源。

    噬菌體分型:根據5株噬菌體(VP1-VP5)可將埃爾托弧菌分成32個噬菌體型,常見的流行株為噬菌體1型(對5株噬菌體型全敏感)、3~5型,2型主要是1型的粗糙型,6型以后屬非流行株。
    埃爾托弧菌生物分型:根據菌株的溶原性、對溶原噬菌體的敏感性、山梨醇發酵和溶血試驗等生物學性狀可將埃爾托弧菌分成12個生物型。

    噬菌體-生物分型:將噬菌體分型與生物分型結合起來,每個噬菌體又可分為幾個生物型,即噬菌體-生物分型,如1a、1b、8i等。常見的流行株為噬菌體1~3型,生物型為a~d,非流行株為噬菌體6~32型,生物型為g~l。通過噬菌體-生物分型,可以了解該地區菌型組成和分布情況。

 

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