在組織培養工作中,配制培養基是日常工作。為簡便起見,通常先配制一系列母液,即貯備液。 所謂母液是欲配制液的濃縮液,這可保證各物質成分的準確性及配制時的快速移取,并便于低溫保藏。一般配成比所需濃度高10~100倍的母液。母液配制時可分別配成大量元素、微量元素、鐵鹽、有機物和激素類等。配制時注意一些離子之間易發生沉淀,如Ca2+和SO42-,Ca2+、Mg2+和PO43-一起溶解后,會產生沉淀,一定要充分溶解再放入母液中。配制母液時要用蒸餾水或重蒸餾水。藥品應選取等級較高的化學純或分析純。藥品的稱量及定容都要準確。各種藥品先以少量水讓其充分溶解,然后依次混合。一般配成大量元素、微量元素、鐵鹽、維生素等母液,其中維生素、氨基酸類可以分別配制,也可以混在一起。母液配好后放入冰箱內低溫保存,用時再按比例稀釋。
下面以MS培養基制備為例,概述其制備方法(表3-2)。
1.大量元素母液可配成10倍液。用分析天平按表3-2稱取藥品,分別加100ml左右蒸餾水溶解后,再用磁力攪拌器攪拌,促進溶解。注意Ca2+和PO43-易發生沉淀。然后倒入1000ml 定容瓶中,再加水定容至刻度,即成為10倍母液。
2.微量元素母液 可配成100倍液。用分析天平按表準確稱取藥品后,分別溶解,混合后加水定容至1000ml。
3.鐵鹽母液 可配成100倍液,按表稱取藥品,可加熱溶解, 混合后加水定容至1000ml 。
4.有機物母液 可配成500倍母液。按表分別稱取藥品,溶解,混合后加水定容至500ml 。
5.激素母液的配制
每種激素必須單獨配成母液,濃度一般配成1mg/ml。用時根據需要取用。因為激素用量較少,一次可配成50ml 或100ml。另外,多數激素難溶于水,要先溶于可溶物質,然后才能加水定容。它們的配法如下:
I AA、IBA、GA先溶于少量的95%的酒精中.再加水定容到一定濃度.
NAA可溶于熱水或少量95%的酒精中,再加水定容到一定濃度.
2,4-D可用少量NaOH溶解后,再加水定容到濃度。
Kt和BA先溶于少量1mol的HCl中再加水定容.
玉米素先溶于少量95%的酒精中,再加熱水到一定濃度.
配制好的母液瓶上應分別貼上標簽,注明母液名稱、配制倍數、日期及配
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