腸桿菌科作為食品衛生指標菌在歐洲已有多年歷史，對其檢驗方法不少學者曾進行了研究。目前北歐食品分析委員會（NMKL）及ISO已制定了食品中腸桿菌科檢驗的標準方法。包括了直接增菌和前增菌的定性方法；菌落計數和帶恢復的MPN定量方法。近年來，隨著對外貿易的發展，歐洲一些國家已對我國出口的某些食品和動物飼料提出了檢測和限量要求。且將其作為國際間食品微生物學實驗室質量控制、水平測試的必測項目之一。我國大多數食品衛生檢驗人員對該項指標和檢驗方法缺乏了解，為適應外貿發展需要，原天津、遼寧商檢局的技術人員，采用標準菌株和自然食品樣品參照國外現有標準方法進行了研究，制定了《出口食品中腸桿菌科檢驗方法》行業標準。該行業標準有如下特點：

　　1、制定了兩種定量檢驗方法，可根據對各種食品規定的不同限量標準或加工方式進行選擇。菌落計數法適用于檢查未經加工處理的生鮮食品或腸桿菌科計數限量>100/g的加工食品，帶恢復的MPN法適用于腸桿菌科計數≤100/g的加工食品。

　　2、采用了亞致死性損傷菌恢復步驟并成功地應用于MPN定量法中，對冷凍產品，加熱冷凍產品采用36±1℃4h恢復，對加熱干燥等處理過的食品需用36±1℃18－24h恢復。

　　3、將國外現有標準方法中EE肉湯作了改良，即將原配方中的膽汁含量由20g/L降至10g/L。大大降低了對腸桿菌科細菌的抑制力，提高了方法的靈敏度和檢出率。

　　4、對在分離培養基VRBGA上經36±1℃培養24h后，菌落直徑仍<0.5mm的腸桿菌科。如奇異變形桿菌、小腸結腸炎耶爾森氏菌等延長培養時間至48h，彌補了國外現有方法中僅在VRBGA 36±1℃培養24h后，挑選菌落直徑>0.5mm的腸桿菌科菌落可造成漏檢之不足。

　　5、NMKL法僅以氧化酶陰性、ISO方法以氧化酶陰性和葡萄糖瓊脂呈黃色為陽性對腸桿菌科進行確認。前法可將不發酵葡萄糖，但可利用蛋白胨生長、氧化酶也為陰性的沃夫氏不動桿菌誤判為腸桿菌科，造成假陽性結果，使計數結果偏高；后法則易將葡萄糖瓊脂表面變為藍色的陰溝腸桿菌，產氣腸桿菌和沙雷氏菌漏檢，出現假陰性，使計數結果偏低。本行業標準采用了氧化酶陰性，葡萄糖瓊脂發酵為全黃或黃色底層、藍色斜面，產氣或不產氣作為判定標準才可對腸桿菌科進行準確的確認。

     6、方法的靈敏度 

（1）菌落計數法的靈敏度為≥10/g  

（2）帶恢復的MPN法的靈敏度為≤10/g或<100/g

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