一、實驗目的：

    學習酵母菌種的擴大培養方法，為實驗室啤酒發酵準備菌種。

二、實驗原理：

    在進行啤酒發酵之前，必須準備好足夠量的發酵菌種。在啤酒發酵中，接種量一般應為麥芽汁量的10%（使發酵液中的酵母量達1×10⁷個酵母/mL），因此，要進行大規模的發酵，首先必須進行酵母菌種的擴大培養。擴大培養的目的一方面是獲得足量的酵母，另一方面是使酵母由最適生長溫度（28℃）逐步適應為發酵溫度（10℃）。

三、實驗器材：

    恒溫培養箱，生化培養箱，顯微鏡等。

四、實驗步驟：

    本次實驗擬用60升麥芽汁，因此應制備6000 mL含1×10⁸個酵母/mL的菌種，以每班10個組計算，每個組應制備約600 mL菌種。建議流程如下：                                                                                   

取協定法制備的麥芽汁濾液（約400 mL），加水定容至約600 mL，取50 mL裝入250 mL三角瓶中，另550 mL至1000 mL三角瓶中，包上瓶口布后，0.05 Mpa滅菌30分鐘。

2.  菌種擴大培養

按上面流程進行菌種的擴大培養（斜面活化菌種由教師提供）。注意無菌操作。

五、注意事項：滅菌后的培養基會有不少沉淀，這不影響酵母菌的繁殖。若要減少沉淀，可在滅菌前將培養基充分煮沸并過濾。

六、思考題：菌種擴大過程中為什么要慢慢擴大，培養溫度為什么要逐級下降？

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