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秋石斛蘭的組織培養



錄入時間:2011-7-18 14:17:11 來源:百度

   以秋石斛蘭優良種質,利用新芽為外植體,采用獨特的培養基進行叢生芽增殖并獲得優質種苗,其特征在于該方法包括以下步驟:
1).材料:秋石斛蘭優良種質;
 
2).外植體的消毒:取秋石斛蘭當年生具5-6個節的嫩芽,去除葉片后,用水沖洗干凈后剪成兩段,在超凈工作臺上用70%的酒精浸泡1分鐘,再用0.1%升汞溶液滅菌10分鐘,無菌水沖洗5次后,用無菌吸水紙吸干,剪取2-3厘米帶節的莖段和莖尖,接種到原球莖和叢生芽誘導培養基上;
 
3).原球莖和叢生芽的誘導:誘導培養基為MS+6-芐基嘌呤1-5毫克/升+萘乙酸 0.2-0.5毫克/升+15%椰子水培養基上,在培養溫度26±2℃條件下,10天莖尖開始生長,20天左右莖段節上有新芽形成并生長,當6-芐基嘌呤為4-5時新芽基部有原球莖產生,培養基含蔗糖30克/升,pH5.5-5.8,瓊脂0.7%;
 
4).叢生芽增殖:將利用莖段和莖尖培養得到的叢生芽,剪去部分葉片轉移到叢生芽增殖培養基:MS+6-芐基嘌呤1-5毫克/升+萘乙酸0.2-0.5毫克/升+15%椰子水,能誘導原球莖和叢生芽形成,原球莖能在較高的6-芐基嘌呤濃度培養基上增殖,原球莖轉入較低6- 芐基嘌呤濃度的培養基時會分化出叢生芽,叢生芽在較低6-芐基嘌呤濃度的培養基上能增殖;
 
5).生根壯苗培養:叢生芽增殖多代后,可將叢生芽切割成單個芽,接種在1/2MS 培養基+萘乙酸0.5-1.0毫克/升+香蕉汁100克/升+活性碳0.5克/升的生根壯苗培養基上進行生根壯苗培養,40天能形成株高3-4厘米的完整植株;
 
6).試管苗移栽:試管苗移栽時,在自然光照下煉苗5-10天,將秋石斛蘭小苗從玻璃瓶中取出,洗凈根部的培養基,在0.1%的高錳酸鉀溶液中浸泡5分鐘后涼干,以小塑料盆為栽培容器,以浸泡過的泥炭蘚為栽培基質,保持適當通風和足夠的濕度,冬季時采用溫室種植,溫度維持在15℃以上。 

 

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