分枝桿菌生物學特性觀察
材料
結核分枝桿菌的培養物
方法
觀察結核分枝桿菌在改良羅氏培養基(含蛋黃、甘油、馬鈴薯和天門冬酰胺等)上的菌落特點:呈干燥顆粒狀,乳白色或米黃色,形似花菜心。結核桿菌12~24h繁殖一代,3~4W形成菌落。
抗酸染色法
原理
分枝桿菌細胞壁含脂質較多,其中主要成分為分枝菌酸,此物具有抗酸性,染色時與石炭酸復紅結合牢固,能抵抗酸性乙醇的脫色作用,因此抗酸菌能保持復紅的顏色,達到染色目的。
材料
酒精燈、玻片、結核病人痰液、石碳酸復紅、鹽酸酒精、堿性美蘭等
步驟
1.取開放性肺結核病人的痰液涂片,自然干燥后,通過火焰固定。
2.初染:痰膜上加一小的方形吸水紙,在吸水紙上滴加石炭酸復紅染液,在火焰高處徐徐加溫至冒蒸氣,并維持 5 分鐘(注意切勿讓染液沸騰或煮干),當染液蒸發減少時,需再加染液補充。待標本片冷卻后水洗。
3.用 3% 鹽酸酒精脫色,至無紅色染液流下為止(反復2~3次,一般需要1~2min)水洗。
4.復染:用堿性美藍復染 1 分鐘,水洗,吸干,鏡檢。抗酸桿菌呈紅色,背景及非抗酸菌呈藍色
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