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細菌生化試驗——石蕊牛乳試驗



錄入時間:2008-9-12 9:39:13 來源:青島龙8娱乐官方网站

原理:紫乳培養基中的主要成分為干酪素、乳糖及指示劑等。由于各種細菌對這些成分的作用不同,引起培養基的變化也有不同,觀察的主要變化為:
產酸:主要從乳糖產生酸,指示劑變酸色(石蕊為紅色,溴甲酚紫為黃色)。
酸凝或加有產氣:產酸,并有牛乳的凝固(pH4.7以下);如有氣體形成,則凝塊中有裂隙,在魏氏梭菌則呈“暴烈發酵”。

凝乳酶產生:很少或無酸產生,牛乳凝固。

胨化:部分或大部分牛奶變清亮。

產堿:細菌產生蛋白酶可將干酪素分解產生胺或氨,使培養基的pH進一步升高,呈深紫色。

培養基:加石蕊的酒精飽和溶液于新鮮脫脂牛奶中,使達淺紫色,分裝于小試管,用流動蒸汽滅菌,每天1次,每次1小時,共3天。接種細菌后,培養及觀察一周。

石蕊酒精溶液的制備:8g石蕊在30ml40%乙醇中研磨,吸出上清液,再如此用乙醇操作兩次。加40%乙醇到總量為100ml,并煮沸1分鐘。取用上清液,必要時可加幾滴1N鹽酸使達艷紫色。現在多應用溴甲酚紫代替石蕊,即于100ml脫脂乳中加入1.2ml的1.6%溴甲酚紫的乙醇溶液。

方法:將細菌接種于紫乳培養基中,37℃培養1~7天后觀察結果,根據細菌的種類不同,可呈現上述一種或幾種現象。

 

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