原理:細菌分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚(靛基質),經與試劑中的對位二甲基氨基苯甲醛作用,生成玫瑰吲哚。
培養基:鄧亨氏蛋白胨溶液
試劑:常用下述兩種。
1.歐立希氏(Ebrlich′s)吲哚試劑
對位二甲基氨基苯甲醛(P-dimethyl aminobenzaldehyde) 1g
純乙醇 95ml
濃鹽酸 20ml
先以乙醇溶解試劑,后加鹽酸,要避光保存。
2.Kovacs試劑
對位二甲基氨基苯甲醛 5g
戊醇(聚異戊醇) 75g
濃鹽酸 25ml
方法:以接種環接種待試細菌的新鮮斜面培養物于鄧亨氏蛋白胨溶液中, 37℃培養24~48小時后(可延長4~5天)。于培養液中加入戊醇或二甲苯2~3ml,搖勻,靜置片刻后,沿試管壁加入試劑2毫升。在戊醇或二甲苯下面的液體變紅色者為陽性反應。
也可將一指頭大的脫脂棉,滴上兩滴歐立希氏試劑,再在同處加滴兩滴高硫酸鉀(K2S2O4)飽和水溶液,置于含培養液的被檢試管中,離液面約半寸,置燒杯內水浴煮沸為止,脫脂棉上出現紅色為陽性。此法略繁,但省試劑且準確,因為將試劑加到液體中,吲哚和糞臭素均呈陽性,而用此法,只是吲哚(它能揮發)呈陽性反應。
亦可以濾紙片浸濕1%的二甲基苯丙烯甲醛的10%濃HCl溶液,然后以接種環刮取一環瓊脂的純培養物涂布于該濾紙上。
細菌涂印周圍呈藍色者為陽性,細菌涂印周圍無色澤變化或淡黃色者為陰性。
厭氧菌用蛋白胨水
蛋白胨 20g
葡萄糖 10g
硫乙醇酸鈉 1g
Na2HPO4(無水) 2g
瓊脂 1g
蒸餾水 1000ml
加熱溶解,調整pH至7.4~7.6,過濾,分裝小試管,15磅高壓15分鐘。
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