嗜血桿菌屬與臨床有關的種有9個,而流感嗜血桿菌是一種只侵犯人的兼性厭氧的革蘭陰性桿菌,主要寄生在上呼吸道,與許多感染性疾病有關。為了選擇檢測效果好、成本低的培養基對嗜血桿菌屬進行鑒定與分型,本實驗利用進口原料配制的培養基(H1)和國產原料配制的培養基(H2)對住院病人呼吸道感染者痰液及咽拭子標本200份,其中成人152份、兒科住院患者48份的嗜血桿菌細菌進行了分離培養及鑒定并做血清學分型。
1 材料與方法
1.1 培養基 (1)用進口原料配制的培養基(H1),Oxid公司的胰蛋白大豆瓊脂作基礎,加入10%無菌羊血,15μg/NAD及300μg/ml 桿菌肽制成巧克力平板。(2)用國產原料配制的培養基(H2):浙江天和微生物試劑公司的淋病奈瑟氏菌培養基作基礎,加1%酵母粉,10%無菌羊血,50mg/L萬古霉素制成巧克力平板。(3)血瓊脂平板及普通瓊脂平板:常規法制備。(4)浙江產心腦瓊脂加馬血培養基。
1.2 方法 (1)分離培養:將痰液或咽拭子劃線接種于H1和H2培養基上,置燭缸中(3%~5%CO2),
2 結果
2.1 H1和H2培養基的比較 (1)嗜血桿菌屬細菌在兩種培養基上生長良好雜菌被抑制,H2對草綠色鏈球菌抑制作用明顯。(2)嗜血桿菌分離情況見表1。經χ2檢驗,兩種培養基對嗜血桿菌分離率差異無顯著性(P>0.05)。
2.2 H1培養基對成人與兒童呼吸道標本中嗜血桿菌屬細菌的分離情況 見表2。成人與兒童嗜血桿菌的細菌分別為13株和17株,分離率分別為8.6%和35.4%,其中流感、副流感、副溶血、嗜沫嗜血桿菌的菌株數(分離率)為兩種培養基對200份臨床樣本。表1 嗜血桿菌分離情況表2 成人與兒童臨床標本嗜血桿菌屬分離情況(略)
2.3 血清分型 臨床分離到的9株流感嗜血桿菌,b型1株,非b型8株。
2.4 臨床分離的嗜血桿菌屬細菌在國產心腦瓊脂加馬血培養基上均生長。
3 討論
(1)雖然H2培養檢測結果好,但需要進口,成本高,H2培養基利用國產做基礎,降低了成本。該培養基中的萬古霉素有效地抑制雜菌生長,增加了培養基的選擇性且具有嗜血桿菌菌落易識別的特點。表1顯示H1和H2兩種培養基對嗜血桿菌的分離率差異無顯著性,H1和H2及國產心腦瓊脂加馬血培養基的分離效果相似。
(2)兒童嗜血桿菌屬流感嗜血桿菌分離率(35.4%,12.5%)高于成人(8.6%,0.52%),呼吸道標本中副流感嗜血桿菌分離率高于流感嗜血桿菌。
作者:唐麗英
作者單位: 161005 黑龍江齊齊哈爾,齊齊哈爾市第一機床廠職工醫院