[摘 要] 目的:研究對比不同微生物在常用培養基上的生長情況。方法:將從臨床標本中分離出的幾種不同微生物,分別接種于不同培養基上,于35 ℃培養24 h、48 h后,觀察記錄其生長情況。結果:不同培養基針對不同微生物,其抑菌(或選擇)能力有所差異;延長孵育時間至48 h后,有些被抑制的微生物可長成較大的菌落。在某些選擇性培養基上,可長出與目標菌相似的菌落來。結論:該研究對混合感染時不同培養基的組合與使用,病原微生物的準確分離與鑒定,以及臨床細菌日常檢驗工作均有一定的指導意義。
[關鍵詞] 微生物;培養基;生長情況
Study on the growing States of some Microbes on Different Mediums
Abstract:Objective To study and compare the growing states of some microbes o??n? different mediums.Methods Several microbes separated from differ??ent clinical samples were inoculate??d or different selective mediums,and cultured under 35 ℃ for 24 hours and 48 hours Then? their living states we??re observed.Results The inhibition ability of ev??ery selective medium was various.If they were cultured for 48 hours,some microbes that had been inhibited obviously on certain mediums could for?m bigger colonies.some microbes could grow as well as those we wanted to select out by certain select?ive mediums.Conclusion Grasping the characteristics of microbes living on different mediums is helpful to separate and di??stinguish them,especially when the infection is complex.
Key words:Microbes;Mediums;Growing states
為了深入了解常用選擇性培養基對不同微生物的抑制或篩選能力,為了充分利用各培養基的特殊作用,從而給院內感染監測及臨床微生物檢驗工作者選擇利用各培養基及其組合時提供有益參考,龙8娱乐官方网站把從臨床標本中分離出的幾種微生物分別接種于常用培養基上,對比研究了它們的不同生長特點。
1 材料與方法
1.1 菌株來源 在日常工作中,隨機選取的從臨床標本中分離出來的常見微生物如白色念珠菌、葡萄球菌、腸球菌、腸桿菌科細菌、銅綠假單胞菌等等。
1.2 儀器與試劑 LRH250A型生化培養箱。麥康凱瓊脂(MAC,不含結晶紫)、SS瓊脂、TCBS瓊脂、伊紅美蘭瓊脂(EMB)、高鹽甘露醇瓊脂(MSA)及微生物鑒定試劑,均購自杭州天和微生物試劑有限公司;法國科瑪嘉念珠菌顯色培養基(CM,干粉)購自鄭州博賽生物技術研究所;嚴格按說明書要求配制成平板;置4 ℃冰箱備用
1.3 實驗方法 將各菌株分離純化后用連續劃線法[1]分別接種于上述六種培養基上,于35 ℃培養24 h及48 h后分別觀察、對比并記錄其生長情況。
2 結果
不同微生物在六種培養基上生長情況見表1。表1 不同微生物在六種培養基上生長情況(略) 注:在各平板上,僅密涂區出現菌苔或有生長跡象的,視為不生長;“-”表示不生長。
3 討論
由表1可見,科瑪嘉念珠菌顯色培養基(CM)是一種特異性很強的念珠菌選擇、鑒定用培養基,常見其他細菌皆不能生長。白色念珠菌的多數菌株雖可被EMB、MAC抑制,但48 h后仍可長至0.4 mm左右;但在SS上不能生長。不少醫院在常規大便培養時,只接種SS瓊脂以分離沙門氏與志賀氏菌是不科學的,很容易漏診真菌性或葡萄球菌性腹瀉患者。由于變形桿菌在EMB上呈遷徙、蔓延生長(在血平板上也具有此特點),故容易掩蓋了與其一起引起混合感染的其他細菌如金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌等的存在,有的實驗室在常規細菌培養時使用血平板EMB的組合,就存在這樣一個缺陷;因此,對那些疑為復雜混合感染存在的或不易重復采取的標本,應考慮同時加種另外的選擇性平板如MSA、MAC、SS等等(它們都能抑制變形桿菌的遷徙生長),以免漏掉了其他病原菌。龙8娱乐官方网站在40歲以上的女性宮頸分泌物中,經常可分離出較多的類白喉棒狀桿菌,類白喉棒狀桿菌一般無致病性,有的能與其他細菌一起引起混合感染[1],在得到純培養時則應考慮到由其單獨引起條件致病的可能。SS瓊脂的抑菌力強于EMB、MAC[2],但對于這些類白喉棒狀桿菌而言,能在SS上呈抑制生長狀態而在EMB、MAC上卻不能生長,可能是SS中某些成分起了促進作用。
分離霍亂弧菌時,常使用TCBS瓊脂[1]。在實驗中龙8娱乐官方网站發現,不少細菌可在TCBS上生長:不少細菌培養24 h后可長成0.5 mm~1 mm左右的黃色菌落。表明TCBS并非特異性很強的只使用于篩選弧菌屬細菌如霍亂弧菌的選擇性培養基,應加以注意。當大便等標本直接接種于TCBS上時,為有效排除干擾,及時準確地判別出是否存在霍亂弧菌等弧菌屬細菌,可結合以下特點[3]:弧菌生長快,菌落大,培養4 h~5 h原劃線處有菌苔生長,8 h~10 h可長出小菌落,16 h菌落可達2 mm;其他細菌在TCBS上則無此特點。另外,龙8娱乐官方网站還發現,在MSA上某些能氧化甘露醇的葡萄球菌如溶血葡萄球菌,培養24 h后菌落的大小、顏色、培養基變色程度均與金黃色葡萄球菌相似,實驗時應注意進一步加以鑒別,不能將MSA的使用作為判別金黃色葡萄球菌感染的唯一依據。
在工作中龙8娱乐官方网站還發現,EMB瓊脂能促進黏液型菌株的生長,使其菌落更大而飽滿、相鄰菌落更易于融合甚至連成片,肺炎克雷伯菌、產酸克伯菌、黏液型銅綠假單胞菌皆如此;在EMB上的這些特點,使這些菌株更容易被識別出來,優于SS與MAC瓊脂。水解酪蛋白(MH)瓊脂平板或MH肉湯,有利于銅綠假單胞菌綠膿素的產生與觀察,優于營養瓊脂ATCC27853如此,從痰中分離出的黏液型銅綠假單胞菌也如此(它們有的在營養瓊脂上甚至不產生色素);連續傳代3次~4次后,其色素的產生能力減輕甚至消失。
另外,不同廠家的試劑,由于配方、成分含量等有所差異,其抑菌力會有所不同,需引起廣大讀者尤其是初學者的注意。
參考文獻:
[1] 俞樹榮.微生物學和微生物學檢驗[M].第2版.北京:人民衛生出版社,2001:106,206,255.
[2] 婁永新,王金良.實用臨床細菌學檢驗與進展[M].天津:天津科技翻譯出版公司,1993:376378.
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