器具及材料:
1、干熱滅菌器:玻璃用具等之滅菌用,其內部中心溫度能達
該溫度1小時以上者。
2、高壓滅菌釜:培養基及稀釋液等不能干熱滅菌之材料及用具等之滅菌用,
常以
3、培養皿:內徑
無氣泡,刮傷或其它缺點
4、吸管:通常使用者為10ml及1ml,應有0.1 ml之刻度。
5、培養箱:能維持內部溫差在±
6、水浴:能維持水溫溫差在±1.℃以內者。
7、薄膜過濾裝置:可放置薄膜過濾之漏斗及真空固定支架基座,漏斗應具無菌性
或可滅菌性。
8、濾膜孔徑0.45um化纖維過濾薄膜(水質檢驗用有格子,已滅菌)或同極品,
適用于薄膜過濾裝置者。
培養基:
1.KF鏈球菌洋菜培養基(KF Streptococcus agar) ?? &?nbsp;
蛋白(Proteose peptone)
酵母抽出物(Yeast extract)
氯化鈉(NaCl)
三偶氮鈉(Sodium azide NaN3)
甘油磷酸鈉(Sodiumglycerophosphate)
麥芽糖(Maltose)
乳糖(Lactose)
臭甲酚紫(Bromcresol purple)
洋菜(agar)
蒸餾水 1000ml
秤取各成分(或適量之商業制品)溶于蒸餾水或去離子水中,
 ?; 加熱溶解洋菜,待完全溶解后,繼續加熱5分鐘,冷卻至
?? 最后pH值為7.2士0.2,分裝于培養皿中。
2. 牛膽汁七葉靈洋菜培養基(Bile esculin agar)
牛肉抽出物(Beef extract)
蛋白(Peptone)
七葉靈(Esculin)
牛膽汁(Oxgall)
檸檬酸鐵(Ferric citrate)
洋菜(agar)
蒸餾水 1000ml
秤取各成分(或適量之商業制品)溶于蒸餾水中或去離子水中,
加熱至沸騰并使完全溶解后,于
&nbs?p;  ??; 分裝于培養皿中。
3.腦心浸出液(Brain-heart infusion,BHI)
牛腦浸出物(Calf brain infusion)
牛心浸出物(Beef heart infusion)
蛋白(Protepose Peptone)
葡萄糖(Dextrose)
氯化鈉(NaCl)
磷酸氫二鈉(Na2HPO4)
蒸餾水 1000ml
秤取各成分(或適量之商業制品)溶于蒸餾水或去離子水中,加熱使完全溶解后,分裝于試管中,于
試劑
1.30%過氧化氫試劑
2.革蘭氏染色液(Gram,s stain solution):
革蘭氏染色液組包括哈克氏結晶紫液(Hucker,s crystal violet),革蘭氏碘液,革蘭氏脫色劑及革蘭氏復染液(Safranin)
取樣:用以滅菌之容器或無菌袋盛取水樣品,取檢體量為100ml,若污染情形嚴重時,則可采10ml每一檢體至少做二重復。
過濾:以減壓過濾方式,將檢體過濾之孔徑為0.45 um 濾膜上。
培養:經第2.4節過濾后之薄膜,取出放置在置有KF鏈球菌洋菜培養基之培養皿上,倒置,放入培養箱,在
計數:經培養后,觀察有否菌落生成,若有按紅或粉紅之菌落,是為典型菌落,挑選3至5個典型菌落進行確認試驗,照確認試驗所得之結果一確定之比例計算出糞便性鏈球菌之估計值,以CFU/100ml表示。