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植物組培經典培養基



錄入時間:2010-9-13 14:02:02 來源:青島龙8娱乐官方网站

培養基
培養基是植物組織培養的重要基質。在離體培養條件下,不同種植物的組織對營養有不同的要求,甚至同一種植物不同部位的組織對營養的要求也不相同,只有滿足了它們各自的特殊要求,它們才能很好地生長。因此,沒有一種培養基能夠適合一切類型的植物組織或器官,在建立一項新的培養系統時,首先必須找到一合適的培養基,培養才有可能成功。
 
主要培養基配方
培養基的配置
 
 
主要培養基配方:
1.  CC (mg/L)
大量元素
含量
微量元素
含量
鐵鹽
含量
有機物
含量
其他
含量
KNO3
60.6
H3BO3
0.0155
FeSO4·7H2O
27.8
肌醇
0.5
麥芽糖
20000
NH4NO3
32
MnSO4· 4H2O
0.0575
Na2EDTA·2H2O
37.3
煙酸
0.03
甘露醇
36430
MgSO4 7H2O
12.35
ZnSO4· 7H2O
0.0288
 
 
鹽酸硫胺素
0.0425
蔗糖
30000
KH2PO4
6.8
Na2MoO4·2H2O
0.0012
 
 
鹽酸吡哆醇
0.005
瓊脂
8000
CaCl2 2H2O
29.4
CuSO4·5H2O
0.0000125
 
 
甘氨酸
0.01
 
 
 
 
CoCl2· 6H2O
0.0000119
 
 
 
 
 
 
 
2.  NB
大量元素
含量
微量元素
含量
鐵鹽
含量
有機物
含量
其他
含量
KNO3
141.5
H3BO3
0.015
FeSO47H2O
27.8
肌醇
0.5
谷氨酰胺
500
(NH4)2SO4
23.15
MnSO4 4H2O
0.05
Na2EDTA2H2O
37.3
煙酸
0.005
水解L蛋白
300
MgSO4 7H2O
9.25
ZnSO4 7H2O
0.01
 
 
鹽酸硫胺素
0.05
脯氨酸
500
KH2PO4
20
Na2MoO4 2H2O
0.00125
 
 
鹽酸吡哆醇
0.005
蔗糖
30000
CaCl2 2H2O
8.3
CuSO4 5H2O
0.0000125
 
 
 
 
瓊脂
8000
 
 
CoCl2 6H2O
0.0000125
 
 
 
 
 
 
 
 
KI
0.00375
 
 
 
 
 
 
 
3.  N6
是1974年朱至清等為水稻等禾谷類作物花藥培養而設計的。其特點是成分較簡單,KNO3和(NH4)2SO4含量高。在國內已廣泛應用于小麥、水稻及其他植物的花藥培養和其他組織培養。
 
大量元素
含量
微量元素
含量
鐵鹽
含量
有機物
含量
其他
含量
KNO3
2830
H3BO3
1.6
FeSO47H2O
27.8
煙酸
0. 5
蔗糖
30000
(NH4)2SO4
463
MnSO4 4H2O
4.4
Na2EDTA2H2O
37.3
鹽酸硫胺素
1
瓊脂
8000
MgSO4 7H2O
185
ZnSO4 7H2O
1.5
 
 
鹽酸吡哆醇
0.5
 
 
KH2PO4
400
KI
0.8
 
 
甘氨酸
2
 
 
CaCl2 2H2O
166
 
 
 
 
 
 
        
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
4.  MS
是1962年由Murashige和Skoog為培養煙草細胞而設計的。特點是無機鹽和離子濃度較高,為較穩定的平衡溶液。其養分的數量和比例較合適,可滿足植物的營養和生理需要。它的硝酸鹽含量較其他培養基為高,廣泛地用于植物的器官、花藥、細胞和原生質體培養,效果良好。有些培養基是由它演變而來的。
 
大量元素
含量
微量元素
含量
鐵鹽
含量
有機物
含量
其他
含量
KNO3
1900
H3BO3
6.2
FeSO47H2O
27.8
肌醇
100
蔗糖
30000
NH4NO3
1650
MnSO4 4H2O
22.3
Na2EDTA2H2O
37.3
煙酸
0.5
瓊脂
8000
MgSO4 7H2O
370
ZnSO4 7H2O
8.6
 
 
鹽酸硫胺素
0.5
        
 
KH2PO4
170
Na2MoO4 2H2O
0.25
 
 
鹽酸吡哆醇
0.5
 
 
CaCl2 2H2O
440
CuSO4 5H2O
0.025
 
 
甘氨酸
2
 
 
 
 
CoCl2 6H2O
0.025
 
 
 
 
 
 
 
 
KI
0.83
 
 
 
 
 
 
 
5.  MSM
大量元素
含量
微量元素
含量
鐵鹽
含量
有機物
含量
其他
含量
KNO3
1900
H3BO3
6.2
FeSO47H2O
27.8
尼克酸
4.5
水解L蛋白
2000
NH4NO3
1650
MnSO4 4H2O
22.3
Na2EDTA2H2O
37.3
鹽酸硫胺素
9.9
蔗糖
30000
MgSO4 7H2O
370
ZnSO4 7H2O
8.6
 
 
鹽酸吡哆醇
9.5
瓊脂
8000
KH2PO4
170
Na2MoO4 2H2O
0.25
 
 
 
 
 
 
CaCl2 2H2O
440
CuSO4 5H2O
0.025
 
 
 
 
 
 
 
 
CoCl2 6H2O
0.025
 
 
 
 
 
 
 
6.改良懷特培養基
是1943年由White為培養番茄根尖而設計的。1963年又作了改良,稱作White改良培養基,提高了MsSO4的濃度和增加了硼素。其特點是無機機鹽數量較低,適于生根培養。
 
大量元素
含量
微量元素
含量
鐵鹽
含量
有機物
含量
其他
含量
KNO3
80
H3BO3
1.5
Fe2(SO4)3
2.5
肌醇
100
蔗糖
30000
Ca(NO3)2 4H2O
300
MnSO4 4H2O
7.0
 
 
煙酸
0.3
瓊脂
8000
MgSO4 7H2O
720
ZnSO4 7H2O
3.0
 
 
鹽酸硫胺素
0.1
        
 
NaH2PO4 4H2O
16.5
MoO3
0.0001
 
 
鹽酸吡哆辛
0.1
 
 
KCl
65
CuSO4 5H2O
0.001
 
 
甘氨酸
3
 
 
Na2SO4
200
 
 
 
 
 
 
 
 
 
培養基的配置
在植物組織培養工作中,配制培養基是日常必備的工作。為簡便起見,通常先配制一系列母液,即貯備液。所謂母液是欲配制液的濃縮液,這樣不但可以保證各物質成分的準確性及配制時的快速移取,而且還便于低溫保藏。一般母液配成比所需濃度高10-100倍。母液配制時可分別配成大量元素、微量元素、鐵鹽、有機物和激素類等。配制時注意一些離子之間易發生沉淀,如Ca2+和S042+,Ca2+、Mg2+和PO43- 一起溶解后,會產生沉淀,一定要充分溶解再放入母液中。配制母液時要用蒸餾水或重蒸餾水。藥品應選取等級較高的化學純或分析純。藥品的稱量及定容都要準確。各種藥品先以少量水讓其充分溶解,然后依次混合。一般配成大量元素、微量元素、鐵鹽、維生素等母液,其中維生素、氨基酸類可以分別配制,也可以混在一起。母液配好后放人冰箱內低溫保存,用時再按比例稀釋。
 
母液的配制方法:
•單配法:將培養基配方中的各種成分分別配成一定濃度的母液。一般用a:b表示,即每b毫升溶液中含有a毫克溶質。
•混配法:將幾類營養成分按配方中的用量擴大一定倍數稱量,分別溶解后每一類混合在一起定容到一定體積配成混合母液,濃度可用a mg/L表示,即配制一升培養基吸取該母液a ml.
•生長素配制時可先用少量95%酒精助溶。2,4—D可用0.1mol/L的NaOH或KOH助溶,加入溫水定容。生長素常配成1mg/ml的溶液貯于冰箱中備用。
•細胞分裂素類一般先用少量1N鹽配溶解后,再加入溫水冷卻后定容,
•鐵鹽配法(MS為例):在裝有400ml  蒸餾水的燒杯中加入2粒苛性鈉,溶解后加入3.73g EDTA-Na2,加熱使其全部溶解,然后邊攪拌邊慢慢加入2.78g FeSO4.7H2O直至全部溶解,冷卻后定容至500ml,置于冰箱中備用。

 

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