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《水生微生物實驗法》——從沉積物中分離霉菌



錄入時間:2010-9-13 13:56:04 來源:青島龙8娱乐官方网站

 

在海洋中霉菌比放線菌多,但比細菌少.霉菌分布在近岸海水、海泥及海藻休上.多數是陸上常見的霉菌.也有引起魚類疾病的水霉目血鰓霉、膚鰓霉和綿霉,是水中分解動植物殘體的常見霉菌

1 .培養基成分及其制備

1)麥芽汁是釀造啤酒前未經發酵,未加酒花的新鮮麥芽汁,可向啤酒廠購買,也可自制。取麥芽粉1公斤加水3 ,在60 下保溫,使其糖化至無淀粉反應(檢查方法:取糖化液0.5毫升.加碘液2 滴,如無藍色出現即糖化完全)為止.過濾,加2-3 個雞蛋清(有助于麥芽汁澄清)、拌勻.煮沸,再過濾.則得麥芽汁。加自來水(或海水)稀釋至10-15 波美,調pH4.2 ,如制成固體培養基則加2%瓊脂,分裝燒瓶中.121 蒸汽下滅菌15 分鐘。制成平板或斜面,可培養霉菌或酵母菌。

2)麥芽汁培養基:

麥芽膏20

瓊脂20

陳海水或自來水1000毫升

將各成分溶解于水中,用氫氧化鈉溶液調pH 6.5 ,分裝,121 蒸汽下滅菌20 分鐘。制成平板或斜面,待用。

3)麥芽汁葡萄糖瓊脂:

麥芽膏20

葡萄糖20

蛋白胨l 克.

瓊脂20

陳海水或蒸餾水1000毫升

將各成分溶解于水后,分裝,112 蒸汽下滅菌15 分鐘.制成平板或斜面.

2 .分離步驟

1)按10倍稀釋法將樣品制成合適的稀釋液(10-210-310-4)。

2)各取0.1毫升稀釋液于加數滴80%乳酸的麥芽葡萄糖瓊脂平板培養基上,用無菌彎曲玻棒涂勻.每個稀釋度制2 個培養皿。

3)倒置培養皿于25-30 下培養3-4 天.

4)觀察菌落特征,挑取所需菌落接種于斜面培養基上.

 

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