水中放線菌無論在數量上或在種類上都比其他的細菌少得多。但在水、沉積物及浮游生物中都能分離到放線菌,如Kpucc 從海泥及浮游生物中分離到灰色放線菌、球孢放線菌及直線白色放線菌等三種。在淡水中也有多種放線菌,如游動放線菌屬等。
1 .培養基成分及其制法
① 葡萄糖酵母膏牛肉膏蛋白胨瓊脂 即埃默森氏培養基.葡萄糖、酵母膏可減至每升l 克,也可省去氯化鈉。此培養基適用于放線菌的分離、其成分如下:
葡萄糖
酵母膏
牛肉膏
蛋白胨
NaCl (用子淡水種)
瓊脂
陳海水(用于咸水樣品)
或蒸餾水(用于淡水樣品)1000毫升
調pH 至7.2-7.4 ,
② 高氏(Gause )1號斜面培養基,此種培養基適于放線菌的純化培養。其成分如下;
淀粉(可溶性)
KNO3
MgO2·7H2O
FeSO4·7H2O
K2HPO4
NaCl
瓊脂
陳海水或蒸餾水1000毫升
pH 7.2-7.4
用少量水將淀粉調成糊狀.取500 毫升煮沸水注入糊狀淀粉中,邊加邊攪拌,使其溶解,除瓊脂外,加入其他成分.溶解后加水至1000 毫升.加入瓊脂,并使其溶化,調pH ,分裝于試管,
2 .分離步驟
① 按上法取
② 以10倍稀釋法將泥樣沖稀至10-2和10-3的懸液.
③ 各取0.1毫升懸液放于淀粉銨平板培養基上.以彎曲玻棒涂勻,每個稀釋度制2 個平板.
④ 倒放培養皿于25
⑤ 觀察菌落特征,挑取所需菌落,接種于高氏1 號斜面培養基作純化培養。