（二）芽孢桿菌的分離

海水中有芽孢桿菌屬（Bacillus），如玻璃樣芽孢桿菌、桿狀芽孢桿菌、華麗芽孢桿菌等好氣菌屬。也有嫌氣性的梭狀芽孢桿菌屬。淡水中常有蠟質芽孢桿菌、蕈狀芽孢桿菌等．

1 ．培養基成分及其制備

（1）芽孢桿菌培養基（I）:

K₂HPO₄  0.5 克

MgSO₄ ·7H₂O    0.5 克

檸檬酸鋼鐵銨0.5克

檸檬酸2 克

甘油20 克

L-谷氨酸4 克

陳海水（或自來水）1000 毫升

pH 7.4

( 2 ）巨大芽孢桿菌培養基（II）:

酵母膏2.5 克

胰胨1 克

陳海水或蒸餾水1000毫升

瓊脂18 克

將各成分放于水中加熱溶解，調pH 為7.2 分裝，121℃ 蒸汽下滅菌20 分鐘，制成平板和斜面。

( 3 ）刺激芽孢生長培養基：

蛋白胨10 克

酵母浸出膏3 克

淀粉3 克

MgSO₄ 0.1 克

KH₂PO₄ 1.5 克

Na₂HPO₄ 50 克

水1000 毫升

制法：將上述的成分混和，加熱溶解。調pH 為7.8 ，用濾紙過濾。分裝于15 × 155 毫米的試管，每管約10 毫升．于121 ℃ 下的蒸汽壓下滅菌15分鐘，存于冰箱備用。

用途：用于刺激梭狀菌迅速產生芽孢，即使非常不易產生芽孢的魏氏桿菌，在此培養中也能迅速長出芽孢。

2 ．分離步驟

（1） 將樣品制成懸浮液．置于80 ℃ 水浴鍋中加熱10-20 分鐘，殺死不形成芽孢的其他種菌體（包括所要分離的菌體也被殺死，但芽孢不死，可萌發）。

（2）取出靜置10 分鐘。

（3）按劃線法或稀釋法進行分離純化。

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