（一）水

??制備培養基必須使用純凈的，無微量金屬，殺菌性和抑菌性化學物質的蒸餾水。注意，以加氯的水進行蒸餾所得的蒸餾水，即使在使用前通過離子交換樹脂，也偶含有顯著量的游離氯．所以應進行測試，如正聯甲苯胺試驗顯色。測試后，以硫代硫酸鈉中和后或進行重復蒸餾后才能使用。

（二）瓊脂

瓊脂俗稱洋菜，英文名agar ，為由海藻類（主要足石花菜）提取出來的一種膠體多糖，即半乳聚糖水解后，產生半乳糖及少量五烷糖和有機硫。其化學性質系為一種不帶側鏈的半乳聚糖甙，含有90%右旋半乳糖和10％左旋半乳糖。在約每10個吡喃半乳糖單位有一個首位或次位的羥基被硫酸脂化。其陰離子脂組（-SO₂ -OH ）主要是與鈣結合，但也有少數是和鎂、鈉、或鉀結合。

其制造方法，一般是在每年7-9 月收集海中石花菜，洗滌并經曬干后保存。于冬季冰凍開始時，按1：30 比例將干藻放入水中煮沸，然后加入硫酸少許并煮沸5-6 小時。過濾后待冷，用“漏子”推成粗條，再經日曬夜凍2-3 周后，即成條狀瓊脂。

除少數菌種外，絕大多數細菌都不能分解瓊脂，因而瓊脂在培養某中無營養價值，只是在液體培養基中凝結成半固體或固體培養基而已。

國外商售瓊脂一般比較純凈，國內瓊脂則含有雜質較多，故在使用前應先用冷水浸泡洗滌后才能使用。

供細菌培養使用的品質優良的瓊脂應具有下列特性：

( l ）凝固點不超過2 ℃ ，通常范圍在34～38 ℃ 。

( 2 )1L 的1.5%瓊脂，在蒸汽浴中重新完全溶化，不超過45 分鐘。

( 3 ）在98 ℃ 能完全溶解子水。

( 4 ）在45 ℃ 仍保待足夠的液態，以利于試驗時的混合均勻。

( 5 ）與水的結合水平至少在50%以上，以保證完全的溶解性。

（6）含水量不超過原重17%。

( 7 ）燃燒殘余物不超過3 %。

（8）金屬最高允許含量，鉛0.0005%，鐵0.001%，鎂0.1%，鈣0.2%，鈉0.4%，并不得含有抗菌物質。

( 9 ）透明度：在蒸餾水中加熱溶解后，呈微乳白色透明凝塊。無混濁沉淀及微粒。

( 10 ）凝膠強度：即在1.5%瓊脂平板1cm² 表面上于20秒鐘內使其破壞的最小重量(g)。優良瓊脂應在300-400克。

在實際應用中，一般均將瓊脂做成按0.5%的差距，遞增至3%的生理鹽水瓊脂平板，然后用接種環或接種針試行劃線涂布，以決定該批瓊脂實際使用的濃度。

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