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真菌培養基



錄入時間:2010-8-18 10:55:31 來源:青島龙8娱乐官方网站

一、沙保羅瓊脂培養基

[用途]

供真菌及酵母樣真菌的分離培養用

[配法]

麥芽糖40g ,蛋白胨10g ,瓊脂20g ,蒸餾水1L

將上述成分溶于水,加熱溶解,調pH 6.0 0.2 ,分裝三角瓶或試管中,118 滅菌15min ,傾注平板或置斜面,無菌試驗后備用

[用法]

將標本接種培養基,如系血液標本,則采取1-2ml,與冷卻至45 左右沙保瓊脂混合,傾注接種平板。分別置35 25 恒溫箱內同時培養。35 培養48h , 25 需連續培養5 天,逐日觀察結果。發現真菌及酵母樣可疑菌落,轉種沙保菌斜面,獲得純培養后進行鑒定。

[質量控制]

白色念珠菌和新型隱球菌生長良好。

注:

(1)    本培養基如不加入瓊脂,即為沙保羅液體培養基,供真菌及念珠菌的增菌培養用。

(2)    增加氯霉素0.05-0.125mgml或放線菌酮0.5mgml,可抑制細菌和污染的霉菌及隱球菌生長。此二種藥均耐熱,可直接加入培養基內高壓滅菌。

(3)    添加酵母浸膏5mgml,可促進皮膚癬菌生長。增加維生素B 0.1mgml,可促進紫色癬菌和斷發癬菌生長

(4)    將麥芽糖減少到20g / L ,為沙保羅20g / L 麥芽糖瓊脂培養基,可供誘導真菌產生孢子用

(5)    該培養基呈酸性,應提高20%的瓊脂用量。

二、玉米粉瓊脂培養基

[用途]

鑒定酵母樣真菌用。白色念珠菌在該培養基上25 24h 培養可長出假菌絲,頂端有典型的厚壁孢子,可與其它念珠菌鑒別。

[配法]

玉米粉4g ,瓊脂粉8g ,蒸餾水1L( pH6.0 0.2 )。

將細米粉加水浸泡數分鐘,扎緊瓶口,浸入60 水浴4h ,取出后用沙布過濾,除去粗渣,補足水分。無須調整pH 。加入瓊脂,煮沸溶解,有沉淀物再過濾1 次,分裝試管,121 滅菌15min 備用。

用玻璃片法點種后,置平皿內,保持一定濕度,置23-26 下培養24-48h 。取出玻片培養物,用高倍鏡觀察真假菌絲和有無厚壁孢子。

[質量控制]

白色念珠菌(ATCC 26790)厚膜孢子陽性;新型隱球菌(ATCC 9763)厚膜孢子陰性

注:

(1)    玉米粉可用糯米粉或可溶性淀粉代替,效果相同。

(2)    該培養基加入10 mlL Tween-80 ,制成玉米粉Tween-80 瓊脂,用途相同,效果更好

 

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