細菌檢驗工作的基本技術——嗜血桿菌屬

錄入時間:2010-7-14 9:24:34 來源：互聯網

嗜血桿菌屬

一、常規鑒定

1．與相關菌屬、種的鑒別：嗜血桿菌屬常與放線菌屬、艾肯菌屬、心桿菌屬、金氏菌屬相鑒別，見下表。

表嗜血桿菌屬菌種與相關菌種鑒別試驗

2．屬內鑒別可利用分離培養時，對X、 V因子的需要和溶血性可初步區別不同的嗜血桿菌種。

進一步的鑒別可通過生化試驗來確定到種。流感嗜血桿菌發酵木糖，與埃及嗜血桿菌木糖不發酵相區別。杜克雷嗜血桿菌有特殊臨床來源，所以較易診斷。屬內種的鑒別見下表。

表嗜血桿菌屬中種的特征

注：a．包括埃及嗜血桿菌；D．不同結果；w．弱發酵反應

b．ONPG，O-硝基酚-β-D半乳糖吡喃苷。

(1) 流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌的鑒定。

用金黃色葡萄球菌作“衛星”試驗陽性。但應注意“副流感”只需V因子即生長。可同時用M—H平板作衛星試驗，能在M—H平板呈衛星生長的菌可否定流感嗜血桿菌。二者也可用糖發酵試驗加以鑒別。

(2) 作為院內感染病源追蹤的流行病學的需要，對流感、副流感嗜血桿菌須鑒定到型。可用吲哚、尿素、鳥氨酸3個試驗將“流感嗜血桿菌”分為8個生物型(詳見表)，或用血清學進行分型。

表流感嗜血桿菌及副流感嗜血桿菌生物型鑒別

注：a．埃及嗜血桿菌與流感嗜血桿菌Ⅲ生物型主要生化特性相似，二者區別參考有關資料。

二、試驗方法

1．衛星試驗：挑取可疑菌落密涂劃種于血平板上或M—H平板上，再將金黃色葡萄球菌點種或劃種其上，35℃24h孵育。如葡萄球菌菌落鄰近處被檢菌的菌落較大，遠離葡萄球菌菌落處的菌落小或不生長，即“衛星”試驗陽性。在血平皿上劃上葡萄球菌時，X，V因子都具備，在M-P,平板上接種葡萄球菌、只具備V因子。

2．糖發酵試驗

培養基：1％糖的酚紅肉湯，并補充所需生長因子，方法參考奈瑟菌鑒定。

3．吲哚(快速法)試驗：在pH 6.8的磷酸緩沖液(0.05mol)中，加0.1％的L-色氨酸。大量接種被檢菌，孵育4h后，加Kovacs試劑。

4．尿素酶試驗

培養基：

KH₂PO₄ 0.1g

K₂HPO₄ 0.1％

NaCl 0.5g

0.2％酚紅水溶液 0.5ml

蒸餾水 100ml

pH 7.0高壓后加20％的尿素溶液 10.4ml。

方法：與其他菌相同。注意接種量要大，4小時觀察結果。

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