Ⅲ級生物安全柜用于操作危險度4級的微生物材料，可以提供最好的個體防護。Ⅲ級生物安全柜的所有接口都是“密封的”，其送風經HEPA過濾，排風則經過兩個HEPA過濾器。Ⅲ級生物安全柜由一個外置的專門的排風系統來控制氣流，使安全柜內部始終處于負壓狀態（大約124.5 Pa）。只有通過連接在安全柜上的結實的橡膠手套，手才能伸到工作臺面。Ⅲ級生物安全柜應該配備一個可以滅菌的、裝有HEPA過濾排風裝置的傳遞箱。Ⅲ級生物安全柜可以與一個雙開門的高壓滅菌器相連接，并用它來清除進出安全柜的所有物品的污染。可以將幾個手套箱連在一起以增大工作面積。Ⅲ級生物安全柜適用于三級和四級生物安全水平的實驗室。

 

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