房間空氣從前面的開口處以0.38 m/s的低速率進入安全柜，空氣經過工作臺表面，并經排風管排出安全柜。定向流動的空氣可以將工作臺面上可能形成的氣溶膠迅速帶離實驗室工作人員而被送入排風管內。操作者的雙臂可以從前面的開口伸到安全柜內的工作臺面上，并可以通過玻璃窗觀察工作臺面的情況。安全柜的玻璃窗還能完全抬起來，以便清潔工作臺面或進行其他處理。
　　安全柜內的空氣可以通過HEPA過濾器按下列方式排出：（a）排到實驗室中，然后再通過實驗室排風系統排到建筑物外面；（b）通過建筑物的排風系統排到建筑物外面；（c）直接排到建筑物外面。HEPA過濾器可以裝在生物安全柜的壓力排風系統（the exhaust plenum）里，也可以裝在建筑物的排風系統里。有些Ⅰ級生物安全柜裝有一體式排風扇，而其他的則是借助建筑物排風系統的排風扇。
　　Ⅰ級生物安全柜是最早得到認可的，并且由于其設計簡單，目前仍在世界各地廣泛使用。Ⅰ級生物安全柜能夠為人員和環境提供保護，也可用于操作放射性核素和揮發性有毒化學品。但因未滅菌的房間空氣通過生物安全柜正面的開口處直接吹到工作臺面上，因此Ⅰ級生物安全柜對操作對象不能提供切實可靠的保護。

 

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